[发明专利]一种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗耐热保护剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗耐热保护剂，其特征在于，所述耐热保护剂包含以下组分：

2.根据权利要求1所述的耐热保护剂，其特征在于，所述耐热保护剂包含以下组分：

3.一种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗耐热保护剂，其特征在于，所述耐热保护剂按重量体积百分比含量(％，单位为g/100ml)计包含以下组分：

其余为注射用水；

优选地，所述耐热保护剂按重量体积百分比含量计包含以下组分：

其余为注射用水。

4.权利要求3所述的耐热保护剂的制备方法，其包括以下步骤：

S1)第一溶液配制：将所需量的羧甲基纤维素溶于注射用水中得到第一溶解液；向所述第一溶解液中加入所需量的蔗糖和麦芽糊精至完全溶解，得到第二溶解液；随后向所述第二溶解液中加入所需量的胰蛋白胨至完全溶解，获得第一溶液；

S2)第二溶液配制：将所需量的甘氨酸溶于注射用水中得到第三溶解液；向所述第三溶解液中加入所需量的聚乙烯吡咯烷酮至完全溶解得到第四溶解液；随后向所述第四溶解液中加入所需量的抗坏血酸至完全溶解，并将pH调整至7.1-7.3，得到第二溶液；

S3)将所述第一溶液和第二溶液混合，获得所述耐热保护剂。

5.一种猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗制剂，其由猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎病毒毒液和权利要求1或2或3所述的耐热保护剂配制而成。

6.根据权利要求5所述的猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗制剂，其特征在于，所述猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎病毒毒液与所述耐热保护剂的溶液的体积配比为(2-3):1，优选3:1。

7.根据权利要求5或6所述的猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗制剂，其特征在于，所述二联活疫苗制剂在使用时，猪流行性腹泻病毒含量≥10^6.00TCID₅₀/ml，可选为10^6.25-10^7.00TCID₅₀/ml，猪传染性胃肠炎病毒含量≥10^6.00TCID₅₀/ml，可选为10^6.50-10^7.50TCID₅₀/ml。

8.根据权利要求5-7中任一项所述的猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗制剂，其特征在于，所述二联活疫苗制剂在37℃下保存7日后病毒抗原含量最多下降10^0.25TCID₅₀/ml，在2-8℃下保存24个月后病毒抗原含量最多下降10^0.50TCID₅₀/ml。

9.权利要求5-8中任一项所述的猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗制剂的配制方法，其包括以下步骤：

T1)将混合的猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎病毒毒液与权利要求1或2或3提及的耐热保护剂的溶液按体积比(2-3):1，优选3:1混匀，得到疫苗原液；

T2)将步骤T1)的疫苗原液冷冻干燥，获得所述猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联活疫苗。

10.根据权利要求9所述的配制方法，其特征在于，步骤T2)中，所述冷冻干燥的工艺为：

(1)预冻阶段：将所述疫苗原液在20min内由常温降温至-20℃，在-20℃保持1h，在20-40min内降温至-40℃～-45℃，在-40℃～-45℃保持3-5h，所述疫苗原液完全冻结后转入抽真空阶段；

(2)抽真空阶段：在20min内将真空度降到100-120mT，转入升华干燥阶段；

(3)升华干燥阶段：2h内将板层温度由-40℃～-45℃升至-20℃并维持8-10h，20min内将板层温度由-20℃升至-10℃并维持6-8h，20min内将板层温度由-10℃升至0℃并维持4-6h，随后转入解析干燥阶段；

(4)解析干燥阶段：将板层温度在1-2h内升温到28℃-30℃，保温6-8h。