[发明专利]CD147在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用在审
申请号: | 202210667402.1 | 申请日: | 2022-06-14 |
公开(公告)号: | CN115144595A | 公开(公告)日: | 2022-10-04 |
发明(设计)人: | 李卓伦;赵志昂;刘小凤 | 申请(专利权)人: | 香港大学深圳医院 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/543;C07K16/28;G01N33/58 |
代理公司: | 深圳市君胜知识产权代理事务所(普通合伙) 44268 | 代理人: | 徐凯凯 |
地址: | 518000 广东省深圳市福*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | cd147 制备 前期 早期 检测 试剂盒 应用 | ||
本发明提供了一种CD147作为生物标志物在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用,利用CD147在早期妊娠母体中的表达水平作为子痫前期的早期检测标志物。子痫前期是一种多因素疾病,临床表现多样,发病机制知之甚少。新标志物CD147的应用,提供了一种与传统方法相比(sFlt:PlGF比率,20怀孕周)检测时间更早的子痫前期检测标志物,最早可于妊娠母体11‑14怀孕周进行子痫前期的检测,有助于对子痫前期进行更具体的早期检测以及临床管理,并为子痫前期的预防和早期干预提供新的科学依据,具有重要的理论意义和重大的社会意义。
技术领域
本发明涉及生物医药技术以及抗原检测领域,尤其涉及一种CD147在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用。
背景技术
子痫前期(PE)是导致产妇死亡及新生儿发病和死亡的最主要原因之一,其发病主要与胎盘发育异常有关。至今,胎盘异常诱发PE病发的机制仍不明确。PE的表型通常在妊娠中期的后期或妊娠晚期被检测到,然而PE的病理发生却始于妊娠早期。
许多子痫前期的生物学标记的研究表明,检测血管生成因子例如PlGF(胎盘生长因子),或者sFlt-1(可溶性fms样酪氨酸激酶-1)与PlGF的比率可作为妊娠早期PE筛查的预测指标。这些标记物的早期(约20周妊娠)和晚期发作子痫前期的检出率分别为87.5%和48.6%,假阳性率为10%。而临床标记物和生物标记物的组合则显示出更高的检测率。然而,目前尚未有能于更早期准确预测PE发生的可靠标志物。在开发新的生物标志物以明确确定子痫前期的早期检测上,仍有改进的空间。
因此,现有技术还有待改进。
发明内容
鉴于上述现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种CD147在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用,利用CD147作为子痫前期的早期检测标志物,通过检测早期妊娠母体中CD147表达水平作为子痫前期的早期检测,为目前子痫前期早期检测试剂盒提供了一种新的生物标志物。
本发明的技术方案如下:
CD147作为生物标志物在制备子痫前期早期检测试剂盒的应用。
一种子痫前期早期检测试剂盒,其中,所述试剂盒包括用于检测CD147蛋白含量的物质。
所述的试剂盒,其中,所述试剂盒包括CD147特异性抗体、抗人CD147特异的生物素化检测多克隆抗体、抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物、显色剂以及洗涤液。
一种子痫前期早期检测试剂盒的应用,其中,将如上任一所述的试剂盒应用于测量人体体液或体外细胞培养上清液中的可溶性CD147蛋白的含量。
所述的子痫前期早期检测试剂盒的应用,其中,测量可溶性CD147蛋白含量的方法包括以下步骤:
1.1取待测样本,离心后获得上清液;
1.2将所述上清液制备成标准和梯度稀释样品;
1.3将CD147特异性抗体预涂在ELISA微孔板上,并将等体积的所述标准和梯度稀释样品分别加入到不同的孔中,密封后在37℃下孵育90min或4℃下孵育过夜;
1.4孵育完成后,向每个孔中加入等体积的抗人CD147特异的生物素化检测多克隆抗体,重新密封后在37℃下第二次孵育60min;
1.5第二次孵育完成后,对每个孔进行洗涤;
1.6洗涤完成后,向每个孔中加入等体积的抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物溶液,重新密封后在37℃下第三次孵育30min;
1.7第三次孵育完成后,对每个孔进行再次洗涤;
1.8再次洗涤完成后,向每个孔中加入等体积的3,3',5,5'-四甲基联苯胺底物显色剂,重新密封后在37℃避光下第四次孵育5-30min;
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