[发明专利]一种适合沙雷氏菌L-鼠李糖诱导表达系统的应用培养基和培养方法有效
| 申请号: | 202210657039.5 | 申请日: | 2022-06-10 |
| 公开(公告)号: | CN114854645B | 公开(公告)日: | 2023-07-07 |
| 发明(设计)人: | 李治;刘芙巧;黄婧祎;李利君;孙燕 | 申请(专利权)人: | 陕西师范大学 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/38;C12R1/425 |
| 代理公司: | 西安永生专利代理有限责任公司 61201 | 代理人: | 高雪霞 |
| 地址: | 710062 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 适合 沙雷氏菌 鼠李糖 诱导 表达 系统 应用 培养基 培养 方法 | ||
1.一种适合沙雷氏菌L-鼠李糖诱导表达系统的应用培养基,其特征在于:所述应用培养基是将液体基础培养基或固体基础培养基高温高压灭菌后自然放冷至60~70℃,再加入NaOH蚀刻的6063铝合金、透性化学试剂和L-鼠李糖配制而成;
所述液体基础培养基每升含蛋白胨8~12g、酵母粉0.5~1.5g、氯化钠4~6g、甘油8~12mL,余量为超纯水,pH 6.8~7.2;
所述固体基础培养基是在每升液体基础培养基中加入琼脂粉15~20g获得;
所述透性化学试剂由表面活性剂、金属螯合剂、有机溶剂组成;
所述沙雷氏菌为
所述液体基础培养基每升加入NaOH蚀刻的6063铝合金45~55g;
所述表面活性剂为吐温、Triton-X、CTAB中任意一种或多种,其加入量为液体基础培养基体积的1%~2%;
所述金属螯合剂为EDTA-Na2、EGTA-Na4中任意一种或两种,其在应用培养基中的终浓度为1.5~5μmol/L;
所述有机溶剂为甲醇、乙醇、氯仿中任意一种或多种,其加入量为液体基础培养基体积的1%~5%;
所述液体基础培养基每升加入L-鼠李糖2~10g。
2.根据权利要求1所述的适合沙雷氏菌L-鼠李糖诱导表达系统的应用培养基,其特征在于所述NaOH蚀刻的6063铝合金的制备方法为:将6063铝合金加洗涤剂去除油污,再用超纯水清洗去除洗涤剂,随后用1~5mol/L的NaOH水溶液浸泡30~180分钟,再用超纯水清洗去除NaOH,121℃灭菌15~20分钟。
3.根据权利要求2所述的适合沙雷氏菌L-鼠李糖诱导表达系统的应用培养基,其特征在于:所述6063铝合金为直径3~5mm的铝合金小球。
4. 一种沙雷氏菌L-鼠李糖诱导的培养方法,其特征在于:接种沙雷氏菌于权利要求1所述的应用培养基中,按28~30℃培养2~2.5小时,接着35~37℃培养2~2.5小时为一个循环,连续进行3个循环共培养12~15小时;所述沙雷氏菌为
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