[发明专利]KC26多肽修饰的牛奶外泌体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种KC26多肽修饰的牛奶外泌体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(a)制备牛奶外泌体，将所得牛奶外泌体添加至溶剂中，得牛奶外泌体溶液；

(b)将KC26多肽添加至超纯水中，搅拌，得多肽溶液；

(c)将上述牛奶外泌体溶液添加到上述多肽溶液中，反应后，冻干保存，得KC26多肽修饰的牛奶外泌体。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤(c)中，所述牛奶外泌体与所述KC26多肽的质量比为1:3。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤(c)中，所述反应为4℃反应24小时。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤(b)中，所述KC26多肽与超纯水的比例为36mg：10mL。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤(a)中，所述牛奶外泌体与溶剂的比例为12mg：1mL；

所述溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、尿素、甘油、氢氧化钠或乙酸中至少一种。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤(a)中，所述牛奶外泌体的制备方法，包括如下步骤：

(a1)牛奶第一离心后，去除脂肪球、酪蛋白和碎片，得第一溶液；

(a2)将上述第一溶液第二离心后，去除大颗粒和微泡，得第二溶液；

(a3)将上述第二溶液第三离心后，弃上清液，洗涤沉淀，得外泌体沉淀；

(a4)将上述外泌体沉淀重新悬浮于磷酸盐缓冲液中，通过0.22μm过滤器过滤、灭菌，得牛奶外泌体。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，

步骤(a1)中，所述第一离心为4℃以13000g离心30min；

步骤(a2)中，所述第二离心为4℃以10万g离心60min；

步骤(a3)中，所述第三离心为4℃以135000g离心90min。

8.权利要求1～7任一项所述的制备方法制备得到的KC26多肽修饰的牛奶外泌体。

9.权利要求8所述的KC26多肽修饰的牛奶外泌体在制备用于治疗视网膜母细胞瘤药物中的应用。

10.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，

将KC26多肽修饰的牛奶外泌体与卡铂混合得用于治疗视网膜母细胞瘤药物。