[发明专利]一种分子标记引物及马铃薯晚疫病检测方法

权利要求书

1.一种用于检测马铃薯晚疫病的分子标记引物，其特征在于，所述分子标记为下列引物对中的一对或多对：

第一引物对：

第一上游引物PiF1：5'-GCTACCAACATCTTCCACAATCT-3'；

第一下游引物PiR1：5'-TCTCTAAAACCTCTGAGCCCCT-3'；

第二引物对：

第二上游引物PiF2：5'-CTGAAAATGGACGGGGATAGCGA-3'；

第二下游引物PiR2：5'-TGCGATGTGAGCGATGGCAAATG-3'；

第三引物对：

第三上游引物PiF3：5'-ATGGACGGGGATAGCGACTCTTA-3'；

第三下游引物PiR3：5'-GATGCCCTTGCTGACTCACCTG-3'。

2.一种马铃薯晚疫病的检测方法，其特征在于，适用权利要求1所述分子标记引物，包括如下步骤：

a)提取待测材料组织DNA；

b)以步骤a)提取得到的DNA为模板，使用所示分子标记引物进行PCR扩增，扩增程序为：94℃预变性3min；94℃变性30s，59.3℃退火30s，72℃延伸1min，共30个循环；最后72℃延伸8min；

c)PCR扩增产物用1.5％的琼脂糖凝胶电泳检测。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述PCR扩增的总体系为20μL：无菌ddH₂O7μL、10μM上游引物1μL、10μM下游引物1μL、2×Easy Taq PCR Super Mix酶10μL、模板DNA 1μL。