[发明专利]一种膀胱灌注药物复方制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种膀胱灌注药物复方制剂，包括能引起肿瘤细胞免疫原性死亡的蒽环类化疗药，免疫调节剂及pH调节剂。这种复方制剂具有良好的化学稳定性，解决了蒽环类化药受到免疫佐剂影响导致杂质增长的问题。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其涉及蒽环类化药和免疫佐剂的复方制剂，以及制备方法和在制备膀胱灌注药物中的应用。

背景技术

膀胱癌是泌尿系统最常见恶性肿瘤，发病率位列全球恶性肿瘤的第九位；2020年全球膀胱癌新发病患者约54.9万人，死亡人数近20万人。全球膀胱癌市场规模2019年增长至39亿美元，预计于2024年达到71亿美元，在美国膀胱癌是治疗费用最贵的肿瘤之一。昂贵的治疗费用主要来自膀胱癌的高复发率以及高转移率，二线治疗方案缺乏，膀胱癌的临床需求远未满足。

临床上常见的膀胱癌主要有两种，非肌层浸润性膀胱癌以及肌层浸润性膀胱癌。目前临床上对于非肌层浸润性膀胱癌主要采用化疗/卡介苗灌注加经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)。研究表明，该疗法对于低危患者：一年复发率15％，五年复发率30％；对于中危患者：一年复发率38％，五年复发率62％；对于高危患者：一年复发率61％，五年复发率78％，卡介苗灌注虽然可以一定程度的解决肿瘤复发问题，但是卡介苗灌注会引起全身性的反应，例如长时间发热，且膀胱灌注卡介苗会出现尿频、尿急、血尿等症状，免疫缺陷的患者使用卡介苗会有患全身性卡介苗疾病的风险。

膀胱灌注是通过将具有直接杀伤肿瘤细胞的化疗药物或肿瘤治疗制剂注入膀胱内部，直接杀伤肿瘤细胞或诱导体内非特异性免疫反应，达到抑制膀胱癌转移复发的效果。经膀胱灌注辅助治疗的患者，其复发概率有所降低，但是绝对缓解率低、肿瘤复发率较高，并且毒副作用大，病人预后差。

蒽环类药物对多种移行上皮细胞癌具有较高的易感性，目前，以表柔比星、吡柔比星为代表的蒽环类化疗药物是膀胱癌灌注治疗的一线治疗药物。但是，单独施用这类药物进行膀胱灌注治疗后，肿瘤依然具有很高的一年内复发率(超过50％)。

Toll样受体(TLR)是先天免疫的组成部分，近年来在免疫治疗领域占有一席之地，该受体在免疫细胞中广泛表达，受到相应的刺激后会促进针对肿瘤的T细胞应答，在抗肿瘤免疫治疗方面，越来越多的人开始关注并研究TLR通路，开发肿瘤免疫治疗类药物。例如咪唑喹啉类免疫调节剂，其中代表性的免疫调节剂有咪喹莫特及其衍生物，是一种TLR-7刺激剂，现已被用于浅表肿瘤的免疫治疗。

发明内容

申请人尝试将蒽环类化药与咪喹莫特联合使用，并应用于膀胱癌的灌注治疗，将两类药物直接混合后进行膀胱灌注，验证疗效。结果发现，以化疗药物表柔比星与咪喹莫特为例，当化疗药物表柔比星与咪喹莫特的比例在一个合适的范围之间时，可以获得与单独化疗药物灌注相比显著提高的治疗效果，且不增加毒副作用，有望成为一种具有显著临床价值的膀胱灌注新型药物制剂。进一步研究表明，这一新型制剂抗肿瘤机理，主要是通过表柔比星等化疗药物诱导肿瘤细胞的免疫原性死亡暴露肿瘤相关抗原，同时咪喹莫特作为TLR7激动剂可以激活免疫系统，招募抗原呈递细胞到肿瘤内来识别肿瘤抗原，进而激活针对肿瘤的T细胞免疫反应。基于该原理，我们又尝试了不同蒽环类化药与咪喹莫特(R837)或瑞喹莫德(R848)联用治疗肿瘤的效果，均取得了理想的疗效。

但是，在进一步地制剂研究中发现，蒽环类化疗药物如表柔比星与免疫佐剂咪喹莫特的简单混合制剂中，咪喹莫特分子的存在会导致表柔比星等蒽环类化疗药物分子结构的不稳定，不论是以注射液的溶液形态保存、还是以混合后冻干粉的形态保存，该制剂中杂质的含量都会明显增加，并在5天时间内突破药典规定的药物的杂质限度，无法成为可以稳定保存的便于临床应用的药物制剂，二者的简单混合不利于药物分子的化学稳定性。因此，如何提高蒽环类化药与咪唑喹啉类免疫调节剂的复方制剂的化学稳定性，是设计制备二者联合用药的复方制剂的关键问题。为了解决上述衍生问题，我们进一步对蒽环类化药与咪唑喹啉类免疫调节剂复方制剂的稳定性进行了系统研究。