[发明专利]提取DNA的试剂盒及DNA提取方法在审
| 申请号: | 202210626821.0 | 申请日: | 2022-06-05 |
| 公开(公告)号: | CN114836413A | 公开(公告)日: | 2022-08-02 |
| 发明(设计)人: | 蓝航镇;卢曼;潘道东;吴振 | 申请(专利权)人: | 宁波大学 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/6806 |
| 代理公司: | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人: | 王莹;袁翊朦 |
| 地址: | 315211 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 提取 dna 试剂盒 方法 | ||
1.一种提取DNA的试剂盒,其特征在于:包括
裂解液,用于裂解生物样品;
萃取棒,用于萃取裂解液中的DNA,该萃取棒包括棒体、固定在棒体外壁上的复合膜,该复合膜包括硝酸纤维膜和粘附在硝酸纤维膜上的吸附材料M-UIO-66-NH2;
清洗液,用于去除萃取棒上除DNA外的其余杂质;
洗脱液,用于将复合膜上吸附的DNA洗脱下来。
2.根据权利要求1所述的提取DNA的试剂盒,其特征在于:所述棒体和复合膜之间粘接固定。
3.根据权利要求1所述的提取DNA的试剂盒,其特征在于:所述硝酸纤维膜和吸附材料M-UIO-66-NH2之间通过聚乙烯吡咯烷酮来粘接固定。
4.DNA提取方法,通过如权利要求1~3中任一项所述的提取DNA的试剂盒来提取DNA,其特征在于:包括
步骤S1、裂解和吸附:将生物样品放置在容器中,加入所述裂解液,将萃取棒放入裂解液中10秒;
步骤S2、清洗:将步骤S1的萃取棒放入清洗液中清洗20秒;
步骤S3、洗脱:将步骤S2经清洗液清洗后的萃取棒放入所述洗脱液30秒。
5.根据权利要求4所述的DNA提取方法,其特征在于:所述裂解液包括pH8.0的100mMTris-HCl、5mM EDTA、200mM NaCl,1%SDS。
6.根据权利要求4所述的DNA提取方法,其特征在于:所述清洗液为去离子水。
7.根据权利要求4所述的DNA提取方法,其特征在于:所述洗脱液为10mM Tris溶液,pH7.0。
8.根据权利要求4所述的DNA提取方法,其特征在于:所述萃取棒采用如下方法得到:
(1)制备M-UIO-66-NH2粉末:将四氯化锆、对苯二甲酸、二氨基对苯二甲酸、乙酸和二甲基甲酰胺充分混合,其中二氨基对苯二甲酸在对苯二甲酸和二氨基对苯二甲酸中所占的质量比为40%;
然后将混合后的材料装入水热合成反应釜中,于马弗炉中120℃加热24小时;冷却至室温后,离心分离得到粉末,用二甲基甲酰胺和乙醇洗涤多次,在150℃真空干燥12小时;
将得到的白色粉末置于马弗炉中350℃下加热2小时,冷却至室温后,得到样品粉末;
(2)制作萃取棒:将上述步骤(1)最终得到的样品粉末分散在甲醇溶液中,放入超声仪超声2小时,再往溶液中加入聚乙烯吡咯烷酮,搅拌均匀后,将硝酸纤维膜作为基底浸入溶液中,风干后得到的为M-UIO-66-NH2膜,即所述的复合膜,最后将复合膜用双面胶粘在棒体的外周壁上,制得所述萃取棒。
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