[发明专利]一种赭鹿花菌分子身份证及其扩增引物、检测试剂盒和物种鉴定方法在审
申请号: | 202210623852.0 | 申请日: | 2022-06-02 |
公开(公告)号: | CN114774580A | 公开(公告)日: | 2022-07-22 |
发明(设计)人: | 田恩静;谢晓梅;段仁和;曹广乘 | 申请(专利权)人: | 吉林农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 戴嵩玮 |
地址: | 130118 吉林*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 赭鹿花菌 分子 身份证 及其 扩增 引物 检测 试剂盒 物种 鉴定 方法 | ||
1.一种赭鹿花菌分子身份证,其特征在于,赭鹿花菌分子身份证的核苷酸序列如SEQID NO:1所示或与SEQ ID NO:1互补的序列。
2.一种特异性扩增权利要求1所述赭鹿花菌分子身份证的引物,其特征在于,包括核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的反向引物。
3.一种鉴定赭鹿花菌的检测试剂盒,其特征在于,包括权利要求2所述引物和检测试剂。
4.根据权利要求3所述检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂包括PCR扩增用试剂。
5.根据权利要求3或4所述检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒还包括阳性标准品;
所述阳性标准品为权利要求1所述赭鹿花菌分子身份证。
6.一种赭鹿花菌的物种鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取待检测样本的基因组DNA;
2)以步骤1)中所述基因组DNA为模板,用权利要求2所述引物进行PCR扩增,得到PCR产物;
3)将所述PCR产物进行电泳和测序,得到122bp的序列判断待检测样本为赭鹿花菌。
7.根据权利要求6所述物种鉴定方法,其特征在于,步骤2)中PCR扩增的反应体系总体系为25μL,包括12.5μL的2×Taq PCR Master Mix12.5μL,2μM上游引物和2μM下游引物各1μL,2μL10ng/μLDNA模板,余量的ddH2O。
8.根据权利要求6所述物种鉴定方法,其特征在于,步骤2)中PCR扩增的反应程序为94℃4min;94℃40s,55℃30s,72℃30s,34个循环;72℃10min。
9.权利要求1所述赭鹿花菌分子身份证、权利要求2所述引物或权利要求3~5任意一项所述检测试剂盒在鉴别赭鹿花菌和近缘种中的应用。
10.根据权利要求9所述应用,其特征在于,所述近缘种包括以下一种或几种:鹿花菌、大鹿花菌、弹性马鞍菌、羊肚菌、波地钟菌、胶陀螺和粗柄马鞍菌。
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