[发明专利]一种交联琼脂糖微球的快速制备方法及应用

权利要求书

1.一种交联琼脂糖微球的快速制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S01、水相琼脂糖溶液的制备，将4~6重量份的琼脂糖粉末，分散于100重量份的去离子水中，机械搅拌并加热至100~150℃，至琼脂糖粉末完全融于去离子水中，得到水相琼脂糖溶液；

S02、油相溶液的制备，将10~20重量份的乳化剂，加入200重量份的有机溶剂中，机械搅拌并加热至65~70℃，均匀搅拌15~25分钟，得到油相溶液；

S03、连续交联反应，将水相琼脂糖溶液滴加至油相溶液中，滴加完成后，维持油相溶液温度60~75℃，继续搅拌15~25min，然后以2~3℃/min的降温速率让反应体系降温低于48℃后，再向反应体系中顺序加入10~40重量份的环氧氯丙烷、10~40重量份的8~20mol/L的NaOH溶液和0~30重量份的无水乙醇，提供碱性环境，间隔搅拌8~11min平衡体系，然后升温到45~50℃，继续搅拌反应100~120min；

S04、去除环氧氯丙烷，先后用乙醇和纯水交替清洗，去除溶液中的环氧氯丙烷，并进行环氧氯丙烷的残余检测，得到交联琼脂糖微球，粒径范围25~120μm，测定环氧基密度60~110umol/ml。

2.根据权利要求1所述的交联琼脂糖微球的快速制备方法，其特征在于，所述乳化剂采用span80或span85。

3.根据权利要求1所述的交联琼脂糖微球的快速制备方法，其特征在于，所述有机溶剂采用环己烷或液体石蜡。

4.根据权利要求1所述的交联琼脂糖微球的快速制备方法，其特征在于，步骤S01中，水相琼脂糖溶液中还分散了3~4重量份的四氧化三铁粉末，得到的交联琼脂糖微球为交联琼脂糖磁珠。

5.根据权利要求1所述的交联琼脂糖微球的快速制备方法，其特征在于，步骤S04中，环氧氯丙烷的残余检测包括：取溶液中的上清液，加入硫代硫酸钠溶液和酚酞指示剂，摇匀10min，不显色，即为无环氧氯丙烷。

6.根据权利要求1~5任一所述的交联琼脂糖微球的快速制备方法制备的交联琼脂糖微球。

7.一种权利要求6所述的交联琼脂糖微球在蛋白纯化方面的应用，其特征在于，包括以下步骤：

交联琼脂糖微球进一步修饰金属镍；

进行蛋白纯化。

8.一种权利要求6所述的交联琼脂糖微球在核酸提取方面的应用，其特征在于，包括以下步骤：

交联琼脂糖微球进一步修饰硅烷基团；

进行核酸提取。