[发明专利]一种特异性鉴定嘉兴槜李种质的ISSR分子标记及其应用

权利要求书

1.一种用于鉴定嘉兴槜李的ISSR分子标记引物，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示，其中Y＝(C,T),N＝(A,G,C,T)。

2.权利要求1所述的ISSR分子标记引物在鉴定嘉兴槜李或在制备鉴定嘉兴槜李的产品中的应用。

3.一种用于嘉兴槜李的分子鉴定试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有权利要求1所述的ISSR分子标记引物。

4.如权利要求3所述的分子鉴定试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还含有PCR扩增所需试剂。

5.一种鉴别嘉兴槜李种质的方法，其特征在于，所述方法为，提取待测样本的基因组DNA作为模板，用权利要求1所述ISSR分子标记引物进行PCR扩增并检测，若出现一条大小为400bp的特异性条带，则待检测李样品为嘉兴槜李。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系为：2.0μL 10×PCR缓冲液，0.5μL dNTP混合液，2.0μL ISSR分子标记引物，1.0μL样品DNA模板，0.2μL Taq DNA聚合酶，补dd H₂O至20μL。

7.如权利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增条件为：

94℃预变性90s；94℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸90s，共35个循环；72℃延伸5min。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述样品DNA模板的浓度为20ng/μL。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述ISSR分子标记引物的浓度为2.5μM。

10.权利要求3或4所述的试剂盒或权利要求5～9所述的方法在鉴定嘉兴槜李种质中的应用。