[发明专利]一种生物法制备睾酮的精制方法

说明书

本发明公开了一种生物法制备的睾酮粗品的精制方法，其包括以下步骤：(1)将干燥的睾酮粗品与醇混匀，升温至60℃以上，使所述睾酮粗品完全溶解并出现絮状变性蛋白沉淀；(2)加入包含活性炭的助滤剂以吸附所述絮状变性蛋白沉淀；过滤收集滤液，滤饼用甲醇淋洗；(3)滴加纯水，混匀后升温至60℃以上，浓缩并回收85wt％的醇溶液；搅拌降温至8℃以下析晶出大量固体，过滤收集滤饼；依次用乙醇和纯水淋洗，滤饼干燥后得睾酮精品。本发明的精制方法对生物法制备的睾酮粗品中K杂及A杂精制效果明显，成品睾酮中K杂含量＜0.15％，A杂含量＜0.05％，符合最新EP10.1标准；成品收率能够达到93％及以上。

技术领域

本发明涉及甾体药物制备技术领域，具体涉及一种用于生物法制备睾酮的精制方法。

背景技术

睾酮(如下式III所示)是一种激素类药物，属于甾体化合物，临床上作为性激素药物治疗原发性和继发性男性性腺功能减退，维持男性第二特征、性功能等。传统合成睾酮的方法是将双烯醇酮醋酸酯肟化、贝式反应、水解等步骤得到雄烯二酮，再以雄烯二酮为原料，经过两步反应得到睾酮粗品，由于从雄烯二酮合成睾酮需要先将3-酮基进行保护，再进行17-酮基还原，该方法步骤较多且粗品中杂质较多，精制成本较高。

随着生物催化以及酶催化技术的发展，细胞转化以及酶催化法制备睾酮逐渐替代了化学合成的方法，利用细胞转化或者酶催化的方法，以雄烯二酮为底物，选择性还原17-酮基成β-羟基，一步转化雄烯二酮到睾酮(路线a)，简化了生产工艺以及节省了生产成本。

但是在该反应中，原料中的K杂前体物质(式IV)也会被转化成K杂(式I)，I杂前体物质(式V)也会被转化成I杂(式VI)。由于K杂(式I)结构与睾酮(式III)极度相似，导致生物法制备的睾酮(式III)中K杂(式I)和A杂(式II)较难除去，需要采用大量乙酸乙酯和正己烷析晶进行精制，工艺复杂且溶剂难以回收，成本较高。

且该方法精制获得的睾酮不符合EP10.1的标准：K杂＜0.15％，A杂＜0.1％，其他单杂＜0.1％。

发明内容

为解决现有技术中生物法制备的睾酮精制产物不符合EP10.1的标准的技术问题，本发明提供了一种用生物法制备睾酮的精制方法。所述精制方法特别是对睾酮中难以精制的K杂以及A杂具有较好的精制效果，成品睾酮中K杂含量＜0.15％，A杂含量＜0.05％，符合睾酮最新EP10.1标准：K杂＜0.15％，A杂＜0.1％。且所用工艺精制工艺较为简单，易于溶剂回收，降低了成本，在优选的技术方案中最后成品收率能够达到96％及以上。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：

(1)将干燥的睾酮粗品与醇混匀，升温至60℃以上，使所述睾酮粗品完全溶解并出现絮状变性蛋白沉淀；

(2)加入包含活性炭的助滤剂，吸附(1)的溶液中的絮状变性蛋白沉淀；过滤收集滤液，滤饼上少量残留的睾酮用甲醇淋洗；

(3)向上述溶液中滴加纯水，混匀后升温至60℃以上，浓缩并回收85wt％的醇溶液；搅拌降温至8℃以下析晶出大量固体，过滤收集滤饼；依次用乙醇和纯水淋洗，将滤饼干燥后得睾酮精品。

在一些具体的实施例中，所述醇包括甲醇、乙醇、乙二醇、异丙醇或正丁醇或由它们组成的混合溶剂。

在一些具体的实施例中，所述包含活性炭的助滤剂中还包括石棉、石墨粉、锯屑、酸性白土、珍珠岩、泥浆、淀粉、硅藻土、造纸、氧化镁、石膏、纤维素和氢氧化铝中的一种或多种。

在一些具体的实施例中，所述精制方法的条件选自以下组：

i)步骤(1)中，所述醇为甲醇或乙醇；

ii)步骤(2)中，所述包含活性炭的助滤剂为活性炭和硅藻土，或活性炭和纤维素。