[发明专利]一种细菌外膜囊泡及其在制备先兆子痫治疗药物中的应用有效
| 申请号: | 202210575879.7 | 申请日: | 2022-05-24 |
| 公开(公告)号: | CN114990038B | 公开(公告)日: | 2023-06-27 |
| 发明(设计)人: | 刘洋;高兴丽;李淑丽;郭永然 | 申请(专利权)人: | 郑州大学 |
| 主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/65;C12N15/31;C12N15/12;A61K31/713;A61K9/50;A61P15/00;A61P9/12;C12R1/19 |
| 代理公司: | 郑州知倍通知识产权代理事务所(普通合伙) 41191 | 代理人: | 李玲玲 |
| 地址: | 450103 河南省郑*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 细菌 外膜囊泡 及其 制备 先兆 治疗 药物 中的 应用 | ||
1.一种细菌外膜囊泡,其特征在于,所述细菌外膜囊泡是通过大肠杆菌重组表达载体诱导表达、纯化得到,细菌外膜囊泡的表面表达有plCSA-BP目标蛋白;
所述大肠杆菌重组表达载体,含有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,表达载体在构建时,是将InaXN冰核蛋白、sfGFP绿色荧光蛋白和plCSA-BP目标蛋白的编码基因构建成重组质粒后,转入减毒大肠杆菌得到。
2.如权利要求1所述的细菌外膜囊泡,其特征在于,所述细菌外膜囊泡的粒径为20~80nm。
3.如权利要求1所述的细菌外膜囊泡,其特征在于,所述大肠杆菌重组表达载体在诱导表达细菌外膜囊泡时,诱导表达的条件为:含有0.1~1mM的异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷的LB液体培养基,20~30℃条件下诱导4~14h。
4.如权利要求3所述的细菌外膜囊泡,其特征在于,所述大肠杆菌重组表达载体在诱导表达细菌外膜囊泡时,诱导表达的条件为:含有1mM的异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷的LB液体培养基,30℃条件下诱导14h。
5.如权利要求1~4任一项所述的细菌外膜囊泡,其特征在于,所述大肠杆菌表达载体在诱导表达细菌外膜囊泡后,采用超滤浓缩法对表达得到的细菌外膜囊泡进行提取和纯化。
6.一种如权利要求1所述的细菌外膜囊泡在制备先兆子痫治疗药物中的应用,其特征在于,将所述细菌外膜囊泡作为载体负载siRNA药物构成载药纳米粒子从而制备先兆子痫治疗药物。
7.如权利要求6所述的细菌外膜囊泡在制备先兆子痫治疗药物中的应用,其特征在于,采用电穿孔技术将siRNA药物载入细菌外膜囊泡中构成载药纳米粒子。
8.如权利要求7所述的细菌外膜囊泡在制备先兆子痫治疗药物中的应用,其特征在于,所述电穿孔技术的操作条件为:细菌外膜囊泡与siRNA质量比为(1~3):(1~3),电穿孔施加电压100~900V。
9.如权利要求8所述的细菌外膜囊泡在制备先兆子痫治疗药物中的应用,其特征在于,所述电穿孔技术的操作条件为:细菌外膜囊泡与siRNA质量比为1:1,电穿孔施加电压700V。
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