[发明专利]一种土壤/底泥活体藻细胞分离提取与快速分类计数方法在审
| 申请号： | 202210550437.7 | 申请日： | 2022-05-18 |
| 公开（公告）号： | CN115046819A | 公开（公告）日： | 2022-09-13 |
| 发明（设计）人： | 林莉;贾迪;张雨婷;董磊;潘雄;张胜 | 申请（专利权）人： | 长江水利委员会长江科学院 |
| 主分类号： | G01N1/28 | 分类号： | G01N1/28;G01N1/34;G01N1/38;G01N15/14 |
| 代理公司： | 武汉楚天专利事务所 42113 | 代理人： | 孔敏 |
| 地址： | 430010 *** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 土壤 活体 细胞 分离 提取 快速 分类 计数 方法 | ||
1.一种土壤/底泥活体藻细胞分离提取与快速分类计数方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)取混合均匀、无明显大型颗粒物及杂质的土壤或底泥样品放入离心管中，称量离心管取样前后的重量，得到样品净重后，向离心管中加入Percoll溶液；
2)轻微震荡后将离心管放入超声波清洗仪；
3)待超声波清洗仪工作完成后取出后离心管，放入离心机；
4)待离心机运转完毕后取出离心管，轻微震荡后用滤网过滤上清液，取部分液体至流式细胞管并运行流式细胞仪，利用流式细胞仪对上清液进行统计与分析，得出所需藻细胞种类与数量。
2.如权利要求1所述的土壤/底泥活体藻细胞分离提取与快速分类计数方法，其特征在于，步骤1)中土壤或底泥的量为1～2mL，所述Percoll溶液用量为5～10mL，浓度为15％～55％。
3.如权利要求1所述的土壤/底泥活体藻细胞分离提取与快速分类计数方法，其特征在于，步骤2)中所述超声波清洗仪设置超声时间为1～3min，功率为20～360W。
4.如权利要求1所述的土壤/底泥活体藻细胞分离提取与快速分类计数方法，其特征在于，步骤3)中所述离心机设置离心时间为3～30min，转速为1000～6000r/min。
5.如权利要求1所述的土壤/底泥活体藻细胞分离提取与快速分类计数方法，其特征在于，步骤4)中所述上清液取10～5000μL，流式细胞仪运转1～5min。
6.如权利要求1所述的土壤/底泥活体藻细胞分离提取与快速分类计数方法，其特征在于，步骤4)中所述滤网选用200～400目滤网。
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