[发明专利]颅缝早闭症小鼠模型、其构建方法及应用

说明书

本申请具体涉及一种颅缝早闭症小鼠模型、其构建方法及应用，该构建方法包括：S1、提供Rosa26supgt;FGFR2/supgt;和Sp7‑CRE小鼠；S2、将Rosa26supgt;FGFR2/supgt;小鼠进行自交，得到具有Rosa26supgt;FGFR2/supgt;阳性表达的F1代小鼠；将Sp7‑CRE小鼠进行自交，得到Sp7‑CRE阳性表达的F1代小鼠；S3、将Rosa26supgt;FGFR2/supgt;‑F1代小鼠和Sp7‑CRE‑F1代小鼠进行杂交，得到F2代小鼠，表现为Rosa26supgt;FGFR2/supgt;和Sp7‑CRE双阳性的即为所述颅缝早闭症小鼠模型。根据本申请的构建方法所构建的颅缝早闭症小鼠模型能筛选出具有稳定的颅缝早闭病理表型的小鼠模型，在实际应用中方便研究FGFR2基因在小鼠遗传性颅缝早闭症中的作用机制。

技术领域

本申请涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种颅缝早闭症小鼠模型、其构建方法及应用。

背景技术

先天性颅缝早闭症是颅骨一个或多个颅缝发生过早的骨性融合，颅缝旁的颅骨及脑组织生长受限，导致颅腔和眶腔狭小、颅内高压、颅颌面畸形的疾病。颅缝早闭症是最常见的先天性颅颌面畸形之一，新生儿中发病率为0.03％～0.05％，居常见颅面发育畸形发病率的第2位(约为1/2000，仅次于唇腭裂畸形)。颅缝早闭发生于胚胎期，出生后随着年龄增长逐渐加重。颅缝早闭不仅造成颅面骨骼发育异常，更严重的是使患儿的大脑发育受到限制。对于先天性颅缝早闭症的早期诊断、早期治疗，保障大脑生长发育及视觉功能等显得尤为重要。

目前需要提供一种具有稳定的颅缝早闭病理表型的小鼠模型和相应的构建方法，基于此，提出本申请。

发明内容

本申请的目的在于提供一种颅缝早闭症小鼠模型、其构建方法及应用，能筛选出具有稳定的颅缝早闭病理表型的小鼠模型。

为达到上述目的，本申请提供如下技术方案：

第一方面，提供一种颅缝早闭症小鼠模型的构建方法，其包括：

S1、提供Rosa26^FGFR2小鼠和Sp7-CRE小鼠；

S2、将Rosa26^FGFR2小鼠进行自交，得到Rosa26^FGFR2-F1代小鼠；将Sp7-CRE小鼠进行自交，得到Sp7-CRE-F1代小鼠；

S3、将Rosa26^FGFR2-F1代小鼠和Sp7-CRE-F1代小鼠进行杂交，得到F2代小鼠，表现为Rosa26^FGFR2:Sp7-CRE双阳性的即为所述颅缝早闭症小鼠模型。

在一些可能的实施方式中，所述Rosa26^FGFR2小鼠和Sp7-CRE小鼠的基因型分别为Rosa26^FGFR2/+和Sp7-CRE^+/-。

在一些可能的实施方式中，所述提供Rosa26^FGFR2小鼠和Sp7-CRE小鼠包括：

用CRISPR/Cas9技术构建Rosa26基因中LoxP-FGFR2条件性过表达小鼠，获得Rosa26^FGFR2/+小鼠；

用CRISPR/Cas9技术构建Sp7基因启动子区域携带CRE元件的Sp7-CRE杂合小鼠。

在一些可能的实施方式中，在所述用CRISPR/Cas9技术构建Rosa26基因中LoxP-FGFR2条件性过表达小鼠，获得Rosa26^FGFR2/+小鼠中，所采用的检测引物WT-F、WT-R、FGFR2-F和FGFR2-R的序列分别如SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.4所示。