[发明专利]一种基于矿物元素和微卫星DNA的西藏牦牛溯源方法

说明书

本发明涉及食品真实性检测鉴别技术领域，具体而言，涉及一种基于矿物元素和微卫星DNA的西藏牦牛溯源方法，包括：牦牛肉预处理；矿物元素和微卫星DNA分析；化学计量学分析。本发明公开的鉴别西藏牦牛的标志物有Mg元素、Cu元素、Se元素、Cd元素、Y元素、La元素、Ce元素、Pr元素、Nd元素、Sm元素、Gd元素、Dy元素、Er元素、TGLA53等位基因片段、TGLA227等位基因片段、HEL13等位基因片段、INRA005等位基因片段、TGLA57等位基因片段、ILSTS013等位基因片段、TGLA73等位基因片段和AGLA293等位基因片段。本发明方法简单、实用、准确，为西藏牦牛溯源研究、真实性鉴别及质量安全控制提供了科学依据，具有强的普适性，适宜推广应用。

技术领域

本发明涉及食品真实性检测鉴别技术领域，具体而言，涉及一种基于矿物元素和微卫星DNA的西藏牦牛溯源方法。

背景技术

牦牛是青藏高原及其毗邻地区特有的优势畜种，是唯一能充分利用青藏高原牧草资源繁衍至今的珍奇稀有的畜种资源，具有高度耐寒性和极强的采食能力。牦牛长期生长在海拔3000m以上的纯天然牧场，人类活动少生态环境没有任何污染，具有“吃的是冬虫草、喝的是矿泉水”之称。随着全球消费者对绿色食品重要性的认识和需求的日益增加，味道鲜美，高蛋白，低脂肪，且含有多种矿物元素和氨基酸，对人体增强抗病、抗寒、提高免疫力均有显著作用，绿色健康的牦牛肉产品也受到了越来越多的关注。西藏自治区有牦牛约395万头，是我国牦牛分布最广的地区，全区各县均有牦牛分布。目前在牦牛真实性鉴别技术领域主要集中在鉴别牦牛和非牦牛方面或是鉴别不同省份的牦牛方面，而针对西藏不同品种牦牛鉴别的研究相对较少。亟待开发相应溯源方法，以维护市场公平，保护消费者权益。

目前，用于动物源产品溯源的检测技术主要有两类一类是理化分析技术，如稳定同位素法、矿物元素法、有机成分指纹分析法、感官分析法等；另一类是DNA指纹分析技术。理化分析技术中矿物元素法分析被认为是动物源产品溯源很有效分析技术。土壤、水、饲料、废弃物以及空气中的痕量元素组成和含量图谱都有其各自的特征。通过水、饮食、空气等介质，环境中的矿物元素在动物体中不断累积，使不同地域来源及不同品种的动物体内元素含量有较大差异。因此，矿物元素组成能够提供地域来源独特的标识，成为较好的溯源指标。但动物体中的矿物元素含量受自然界中的天然含量以及人为添加两方面的影响。而DNA指纹是指建立在DNA分子标记基础上，以生物个体间核苷酸序列变异为基础的遗传标记，可直接在DNA水平上检测生物个体间的差异，是生物个体在DNA水平上遗传变异的直接反映。DNA指纹技术具有理化分析所不及的优势，即鉴别近缘生物源性食品种类。但DNA指纹鉴别技术要求食品的加工程度不能过高。由于深加工食品在加工过程中，DNA几乎完全降解。

传统溯源方法仅仅采用单一技术，或是多种技术结合，但也仅仅局限于理化分析技术结合，例如稳定同位素法和矿物元素法结合或是矿物元素法和有机成分指纹分析法结合。而基于理化分析技术和DNA指纹技术的结合目前还没有报道。综上所述，这两种技术的结合可以互相取长补短，实现西藏牦牛肉的精准溯源。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种高通量、鉴别准确率高的基于矿物元素和微卫星DNA结合的西藏牦牛溯源方法。

为实现上述技术目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种基于矿物元素和微卫星DNA结合的西藏牦牛溯源方法，包括以下步骤：

(1)牦牛肉预处理

采集西藏自治区亚东县帕里地区的帕里牦牛、西藏自治区昌都地区类乌齐县的类乌齐牦牛和西藏自治区林芝地区工布江达县的工布江达牦牛，并对其进行预处理，制备分析样品。

(2)矿物元素和微卫星DNA分析