[发明专利]水凝胶包被miRNA-200s纳米微粒缓释系统在制备视神经炎疾病类药物中的应用

说明书

本发明公开了水凝胶包被miRNA‑200s纳米微粒缓释系统在制备视神经炎疾病类药物中的应用和药物及模型构建方法，涉及生物医药领域。视神经炎疾病类药物通过水凝胶包被miRNA‑200s纳米微粒缓释系统(NSDDS)制备获得；验证视神经炎疾病保护剂模型构建方法包括：对视神经炎疾病造模后小鼠玻璃体腔内注射视神经炎疾病类药物。本发明研究发现水凝胶包被miRNA‑200s纳米微粒缓释系统可制备视神经炎疾病类药物，从而改善视神经炎类疾病损伤，预防及保护炎症及其他原因所致的视力下降甚至失明。本方法治疗的灵敏度高，改善效果显著。本发明具有很好的应用价值和推广前景。

技术领域

本发明涉及寄生虫及神经损伤保护领域，更具体地，涉及一种水凝胶包被miRNA-200s纳米微粒缓释系统在制备预防及保护视神经炎疾病及其它原因所致视力下降甚至失明类药物中的应用和药物及模型构建方法。

背景技术

视神经炎(optic neuritis，ON)是一种累及视神经的常见疾病，涉及炎症脱髓鞘以及轴索损伤。疾病过程可以导致视网膜节细胞(retinal ganglion cell，RGC)死亡、黄斑体积减小以及视觉损伤，甚至永久性的视觉丧失。视神经炎常常伴随眼球疼痛和视力减退。本病病因广杂,无论是毗邻视神经的感染病灶或全身各种感染因子,还是中枢神经系统脱髓鞘疾病或系统性自身免疫性疾病均可能促发或并发视神经炎。

根据病因不同，视神经炎被分为特发性脱髓鞘性视神经炎(亦称经典多发性硬化相关性视神经炎(MS-ON))、视神经脊髓炎相关性视神经炎和其他中枢神经系统脱髓鞘疾病相关性视神经炎。视神经炎的常见临床表现为单眼或双眼视力下降、视神经乳头水肿、视网膜静脉迂曲、扩张及视乳头周围渗出。患者还会出现多种形式的神经纤维束型视野缺损；视觉动作电位(VEP)检查表现表现为潜伏期延长和(或)波幅降低；部分患者视力恢复较差，会遗留严重视力障碍。目前临床上对视神经炎的常规治疗方案有糖皮质激素、多发性硬化症(MS)修正药物(如β-干扰素、醋酸格拉默、米托蒽醌和那他珠单抗等)、免疫抑制剂等。但这些治疗方法难以做到根治，容易形成激素依赖，且病情易反复发作。视神经炎与多发性硬化密切相关，无论是单独治疗视神经炎或是治疗多发性硬化等与视神经炎相关的疾病，目前均未发现何种治疗方法能够改善患者的最终预后。

miRNA是一类广泛存在于真核生物中的单链小分子非编码RNA，通过与靶基因特异性结合，抑制靶基因的翻译甚至降解，参与基因转录后的调控。大量研究已经鉴定出多种miRNA及其靶基因参与CNS修复过程，促进神经保护、轴突再生、神经元可塑性、血管生成等。与其他神经系统疾病一样，选择合适的miRNA提供显着的RGC神经保护作用是首要的关键步骤之一。对视网膜来讲，miRNA及其模拟物或抑制剂可以通过包括病毒和非病毒载体在内的多种方法进入RGC，可作为视觉疾病一种潜在的治疗手段。

有研究发现，miR-200s(141、200a)可调控视网膜节细胞(RGC)的存活。已有文献报道在人类视网膜色素上皮细胞(RPEs)和(RGCs)中过表达miR-141可以下调Keap1(Nrf2的抑制剂)，进而激活Nrf2，从而减少紫外线辐射造成的RPEs和视网膜节细胞凋亡。antagomiR-141和Nrf2 shRNA敲除实验进一步验证了上述结果。在青光眼小鼠模型中，有相关研究结果表明miR-141靶向对接蛋白5(DOK5)，激活MAPK信号通路，最终抑制视网膜血管上皮细胞的增殖和血管生成，促进RGCs的凋亡。也有研究发现在小鼠青光眼模型中，miR-200a的表达下调，而成纤维细胞生长因子7(FGF7)显著上调。他们进一步研究发现，将miR-200a模拟物静脉注射到青光眼小鼠模型中，可以显著的保护视网膜节细胞和保存视神经纤维层的厚度，其机制可能是通过抑制FGF7激活MAPK通路来实现的。但miR-200s对视神经炎的作用目前尚无相关研究。