[发明专利]一种增强CAR-T细胞功能的培养基及其应用在审
| 申请号： | 202210522372.5 | 申请日： | 2022-05-13 |
| 公开（公告）号： | CN114736874A | 公开（公告）日： | 2022-07-12 |
| 发明（设计）人： | 钱鹏旭;朱萌;韩颖丽 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867;C12N15/62 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 赵杭丽 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 增强 car 细胞 功能 培养基 及其 应用 | ||
1.一种增强CAR-T细胞功能的培养基，其特征在于，包括基本培养基和SF2523，其中SF2523的使用浓度为500nm-3μM，SF2523的分子式C19H17NO5S，CAS号1174428-47-7。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，基本培养基为：10％体积比的胎牛血清、100U/ml的青霉素、100μg/ml的链霉素以及200U/ml的白介素2，余量为RPMI 1640培养基。
3.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，SF2523的使用浓度为1μM。
4.权利要求1-3任一所述培养基在CAR-T细胞的构建及培养中应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述CAR-T细胞的构建及培养通过以下步骤实现：
(1)分离制备CAR-T细胞所需的T细胞；
(2)构建用于表达CAR基因序列的慢病毒载体，将所述慢病毒载体在转染剂存在的条件下对步骤(1)中的T细胞转染，制成CAR-T细胞，转染剂为聚凝胺；
(3)对步骤(2)制备的CAR-T细胞进行培养，在培养的第1-6天使用基本培养基，在培养的第6～12天使用权利要求1～3任一所述培养基即基本培养基和SF2523。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，在培养全程所述CAR-T细胞在培养基中的浓度为1-10×105个/mL。
7.根据权利要求6所述的的应用，其特征在于，所述CAR-T细胞在培养基中的浓度为5×105个/mL。
8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤(3)中，对CAR-T细胞培养时间12-15天，每1～3天更换一次权利要求1～3任一所述培养基。
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