[发明专利]干细胞来源的视网膜色素上皮的基于MACS的纯化在审
申请号: | 202210521542.8 | 申请日: | 2016-09-07 |
公开(公告)号: | CN114717188A | 公开(公告)日: | 2022-07-08 |
发明(设计)人: | N·迈耶;L·蔡斯;C·斯坦克维兹 | 申请(专利权)人: | 富士胶片细胞动力公司 |
主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079;C12N5/074;C12N5/00 |
代理公司: | 中国贸促会专利商标事务所有限公司 11038 | 代理人: | 陈晓娜 |
地址: | 美国威*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 干细胞 来源 视网膜 色素 上皮 基于 macs 纯化 | ||
1.视网膜色素上皮(RPE)富集的细胞群体,其通过包括以下步骤的方法制备:
a)获得包含RPE细胞的起始细胞群体,其中所述起始细胞群体由诱导性多能干细胞制备;和
b)通过从所述起始细胞群体中耗竭以下细胞来富集所述起始细胞群体的RPE细胞:
(i)CD24阳性的细胞,或
(ii)CD56阳性的细胞,或
(iii)CD24阳性的细胞和CD56阳性的细胞,或
(iv)CD24阳性的细胞和CD90阳性的细胞,或
(v)CD56阳性的细胞和CD90阳性的细胞,或
(vi)CD24阳性的细胞、CD56阳性的细胞和CD90阳性的细胞,由此提供与起始细胞群体相比富含具有Pax6的下调表达和RPE65的上调表达的RPE细胞的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE富集的细胞群体在使用TYRP1和/或PMEL17作为标记测定时是至少90%纯的RPE细胞。
2.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE富集的细胞群体是至少95%的RPE细胞。
3.根据权利要求2所述的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE富集的细胞群体是至少99%的RPE细胞。
4.根据权利要求3所述的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE富集的细胞群体是基本上纯的RPE细胞。
5.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE细胞是人RPE细胞。
6.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中通过基于磁珠的分选或基于荧光的分选耗竭CD24阳性的细胞、CD56阳性的细胞或CD90阳性的细胞。
7.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中通过分别使用识别CD24、CD56或CD90的抗体或适体耗竭CD24阳性的细胞、CD56阳性的细胞或CD90阳性的细胞。
8.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE富集的细胞群体未经遗传修饰。
9.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中所述方法的步骤b)在没有对所述起始细胞群体进行遗传改造的情况下进行。
10.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE富集的细胞群体是通过从所述起始细胞群体中耗竭CD24阳性的细胞来富集所述起始细胞群体的RPE细胞而制备的。
11.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE富集的细胞群体是通过从所述起始细胞群体中耗竭CD56阳性的细胞来富集所述起始细胞群体的RPE细胞而制备的。
12.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE富集的细胞群体是通过从所述起始细胞群体中耗竭CD24阳性的细胞和CD90阳性的细胞来富集所述起始细胞群体的RPE细胞而制备的。
13.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE富集的细胞群体是通过从所述起始细胞群体中耗竭CD90阳性的细胞、CD56阳性的细胞和CD24阳性的细胞来富集所述起始细胞群体的RPE细胞而制备的。
14.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE富集的细胞群体是通过从所述起始细胞群体中耗竭CD24阳性的细胞和CD56阳性的细胞来富集所述起始细胞群体的RPE细胞而制备的。
15.根据权利要求1所述的RPE富集的细胞群体,其中所述RPE富集的细胞群体是通过从所述起始细胞群体中耗竭CD56阳性的细胞和CD90阳性的细胞来富集所述起始细胞群体的RPE细胞而制备的。
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