[发明专利]一种桃金娘诱导愈伤再生成苗的方法有效
| 申请号： | 202210501091.1 | 申请日： | 2022-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN115039696B | 公开（公告）日： | 2023-07-28 |
| 发明（设计）人： | 邓书林;杨玲;吕善武;张艺;杨恒 | 申请（专利权）人： | 中国科学院华南植物园 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星;朱聪聪 |
| 地址： | 510650 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 桃金娘 诱导 再生 方法 | ||
1.一种桃金娘诱导愈伤再生成苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：
A、将无菌的桃金娘试管苗叶片或者茎段作为外植体接种至愈伤组织诱导培养基上诱导培养，得到愈伤组织；
所述的愈伤组织诱导培养基为MS+0.5～1mg/L 6-BA+0.05～0.1mg/L NAA+0.005～0.01mg/L TDZ+蔗糖+琼脂；
B、将所述愈伤组织接种至增殖分化培养基上增殖分化培养，先得到颗粒致密的愈伤组织，后逐渐形成丛生芽；
所述的增殖分化培养基为1/2MS+1～1.5mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/L NAA+蔗糖+琼脂；
C、将所述丛生芽分切并移入生根培养基上进行生根培养，得到再生的小苗；
所述的生根培养基为1/2MS+蔗糖+琼脂；
D、将高6～8cm的生根试管苗去瓶盖置于自然光照下炼苗3～5天后，从培养瓶中取出试管苗并洗去根部培养基，移栽到由腐殖质土和黄沙泥混合成的基质中；
所述的诱导培养的条件是光照强度3000lx，16/8h光/暗条件，温度26℃；所述的增殖分化培养的条件是光照强度3000lx，16/8h光/暗条件，温度26℃；所述的生根培养的条件是光照强度5000lx，16/8h光/暗条件，温度26℃。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的外植体是将无菌的桃金娘试管苗叶片沿叶片主脉方向进行刻伤痕处理，每个叶片刻伤痕处理的个数为2～3个，每个伤痕的长度为1～2mm，然后将处理的叶片作为外植体或者无菌的桃金娘试管苗茎段，将其切成1～2厘米作为外植体。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的愈伤组织诱导培养基为MS+0.5mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA+0.005mg/L TDZ+30g/L蔗糖+琼脂5g/L。
4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的增殖分化培养基为1/2MS+1mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+30g/L蔗糖+琼脂5g/L；
5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的生根培养基为1/2MS+30g/L蔗糖+琼脂5g/L。
6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的基质为由腐殖质土和黄沙泥按质量比3:1混合成。
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