[发明专利]身痛逐瘀汤特征图谱的构建方法

说明书

本发明公开了一种身痛逐瘀汤特征图谱的构建方法，涉及中药质量分析检测技术领域。具体包括：分别取色氨酸、马钱苷酸、龙胆苦苷、羟基红花黄色素A、阿魏酸、甘草苷、芹糖甘草苷、甘草酸、羌活醇对照品，加入溶剂溶解或提取，制得参照物溶液；取身痛逐瘀汤制剂，加提取溶剂提取，制得供试品溶液；采用液相色谱仪测试，具体的，以乙腈为流动相A，磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，构建身痛逐瘀汤的特征图谱。本发明中的方法可为身痛逐瘀汤质量控制提供数据基础，有效保证身痛逐瘀汤产品质量的稳定性和可控性。

技术领域

本发明涉及中药质量分析检测技术领域，尤其涉及一种身痛逐瘀汤特征图谱的构建方法。

背景技术

身痛逐瘀汤出自清代著名中医学家王清任编撰的中医临证各科类著作《医林改错》下卷，原文记载如下：“凡肩痛、臂痛、腰痛、腿痛，或周身疼痛，总名曰痹症。明知受风寒，用温热发散药不愈；明知有湿热，用利湿降火药无功。久而肌肉消瘦，议论阴亏，随用滋阴药又不效。至此便云：病在皮脉，易于为功；病在筋骨，实难见效。因不思风寒湿热入皮肤，何处作痛。入于气管，痛必流走；入于血管，痛不移处。如论虚弱，是因病而致虚，非因虚而致病。……古方颇多，如古方治之不效，用身痛逐瘀汤。”王清任认为既往治疗痹症多从病因病机—风寒、湿热、阴亏论治，偏执温热发散、利湿降火亦或滋阴补虚一端用药，多有药到不效的情况，因而自拟身痛逐瘀汤，记载方剂组成用量，原方由秦艽、川芎、桃仁、红花、甘草、羌活、没药、当归、醋五灵脂、香附、牛膝、地龙等十二味药组成，方中君药红花、桃仁、川芎、当归均能活血祛瘀，臣药羌活、秦艽善于祛风除湿，五灵脂、没药、香附行气血和止疼痛，佐药牛膝、地龙善于疏通经络以利关节，甘草调和诸药。本方功效据古代医籍记载为活血行气，祛瘀通络，通痹止痛，主治瘀血痹阻经络证，例如肩痛，臂痛，腰痛，腿痛，或周身疼痛，痛如针刺，经久不愈。身痛逐瘀汤目前被广泛应用于治疗腰椎间盘突出症、膝关节骨性关节炎、风湿寒性关节痛、骨折及术后并发症、急性腰扭伤等多种骨伤科疾病，同时还被应用于血栓性静脉炎、软组织损伤、恶性肿瘤骨转移疼痛、糖尿病并发症及神经炎等疾病。

近年来，为阐明身痛逐瘀汤治疗疾病的物质基准，保障临床用药的有效性和安全性，许多学者对身痛逐瘀汤中的化学成分和有效组分进行药理学、药效学和药动学等方面的研究，并且不断完善其质量标准，为经典名方的开发奠定了基础。目前，对身痛逐瘀汤的研究主要集中在药理学的研究方面，对其汤剂的物质基础、提取工艺、多指标成分含量测定及特征图谱研究较少，缺少系统性。且对于如何衡量大生产制剂与传统汤剂质量的一致性也研究较少。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种身痛逐瘀汤特征图谱的构建方法，该方法可为身痛逐瘀汤大生产质量控制提供数据基础，保证身痛逐瘀汤产品质量的稳定性和可控性。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种身痛逐瘀汤特征图谱的构建方法，其包括：

(1)分别取色氨酸、马钱苷酸、龙胆苦苷、羟基红花黄色素A、阿魏酸、甘草苷、芹糖甘草苷、甘草酸、羌活醇对照品，加入溶剂溶解或提取，制得参照物溶液；

(2)取身痛逐瘀汤制剂，加提取溶剂提取，制得供试品溶液；

(3)取预设量的参照物溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，构建身痛逐瘀汤的特征图谱。

作为上述技术方案的改进，步骤(3)中，梯度洗脱按下述程序进行：

0～5min，流动相A为6％，流动相B为94％；

5～12min，流动相A从6％→10％，流动相B从94％→90％；

12～22min，流动相A从10％→12％，流动相B从90％→88％；

22～24min，流动相A从12％→16％，流动相B从88％→84％；