[发明专利]一种长循环肾靶向细胞外囊泡的构建及其应用

权利要求书

1.编码白蛋白结合肽段(ABP)的核酸分子，其特征在于，其具有：

(I)、如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；

(II)、如(I)所述的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个核苷酸获得的核苷酸序列，且与(I)所述的核苷酸序列功能相同的核苷酸序列；或

(III)、与如(I)或(II)所述的核苷酸序列具有90％以上同一性的核苷酸序列；

所述取代、缺失或添加一个或多个核苷酸中的多个为1～9个。

2.ABP-Lamp2b融合基因，其特征在于，其结构包括：Lamp2b的N端-ABP-Lamp2b的C端；

所述ABP-Lamp2b融合基因具有：

(i)、如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列；

(ii)、如(i)所述的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个核苷酸获得的核苷酸序列，且与(i)所述的核苷酸序列功能相同的核苷酸序列；或

(iii)、与如(i)或(ii)所述的核苷酸序列具有90％以上同一性的核苷酸序列；

所述取代、缺失或添加一个或多个核苷酸中的多个为1～9个。

3.如权利要求2所述的ABP-Lamp2b融合基因，其特征在于，在所述Lamp2b的N端插入糖基化基序GNSTM，加入3个氨基酸spacer，连接ABP后再加入10个氨基酸spacer；

和/或

在所述Lamp2b的C端插入HA标签。

4.如权利要求3所述的ABP-Lamp2b融合基因，其特征在于，其结构包括GNSTM-3-ABP-10-Lamp2b-HA，具有：

(a)、如SEQ ID No.3所示的核苷酸序列；

(b)、如(a)所述的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个核苷酸获得的核苷酸序列，且与(a)所述的核苷酸序列功能相同的核苷酸序列；或

(c)、与如(a)或(b)所述的核苷酸序列具有90％以上同一性的核苷酸序列；

所述取代、缺失或添加一个或多个核苷酸中的多个为1～9个。

5.包含如权利要求2～4任一项所述ABP-Lamp2b融合基因的表达载体。

6.如权利要求6所述的表达载体，其特征在于，如权利要求2～5任一项所述的ABP-Lamp2b融合基因在Nhe1和BamH1克隆位点处插入载体pcDNA3.1 Hygro(+)，获得的融合基因表达载体为pcDNA GNSTM-3-ABP-10-Lamp2b-HA，具有：

①、如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列；

②、如①所述的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个核苷酸获得的核苷酸序列，且与①所述的核苷酸序列功能相同的核苷酸序列；或

③、与如①或②所述的核苷酸序列具有90％以上同一性的核苷酸序列；

所述取代、缺失或添加一个或多个核苷酸中的多个为1～9个。

7.转化或转染有如权利要求6或7所述表达载体的宿主。

8.如权利要求2～5任一项所述ABP-Lamp2b融合基因、如权利要求6或7所述表达载体、如权利要求8所述宿主直接或间接在制备药物递送载体或药物中的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述药物递送载体包括：取如权利要求6或7所述表达载体转染外泌体和/或细胞外囊泡来源细胞后生产得到的外泌体和/或细胞外囊泡。

10.外泌体和/或细胞外囊泡，其特征在于，其制备方法包括：取如权利要求5或6所述表达载体转染外泌体和/或细胞外囊泡来源细胞后，培养，收集外泌体和/或细胞外囊泡。