[发明专利]一种基于高效液相色谱法的饲料添加剂测定方法及系统

说明书

本发明公开了一种基于高效液相色谱法的饲料添加剂测定方法及系统，选择高效液相色谱仪在190‑490 nm波段内检测饲料添加剂样品的离心上清溶液，在全波段检测并经PDA检测器扫描获得多波长下的色谱图。利用多波长拟合消除杂质峰干扰和吸收峰的拖尾现象，提高单波长下的测量灵敏度和检测精度的同时，避免了多次平行测定校正测量结果的繁琐过程。基于高效液相色谱法的饲料添加剂测定方法及系统，具有测定范围宽，基质干扰小，色谱分离效果好等优点，且快速定量准确，提高了测定饲料添加剂中的吲哚丁酸含量的检测精度，有望为评定饲料产品质量安全提供技术支撑。

技术领域

本发明涉及饲料添加剂检测领域，具体涉及一种基于高效液相色谱法的饲料添加剂测定方法及系统。

背景技术

饲料添加剂是在基础饲料生产中添加微量物质，成分多样种类繁多，在水产养殖业中广泛使用能起到强化营养价值，缩短养殖周期，改善水产品质等作用。饲料添加剂分为营养性饲料添加剂与非营养饲料添加剂两种。研发不同种类的水产动物饲料添加剂，包括饲料级氨基酸、维生素、微量元素、中草药添加剂、诱食剂等，可达到不同的生物学特性、发育阶段、抗病能力等情况的养殖需求。

吲哚丁酸作为一种常用的生长调节剂，在200-400nm范围内有一定的紫外吸收。目前常用测定吲哚丁酸的主要方法为液相色谱法和液质联用法，液相色谱法相比于液质联用法更加的低廉快捷，具有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点，但不能由色谱图直接给出未知物的定性结果，而必须由已知标准作对照定性。因此，当应用于测定饲料添加剂无纯物质对照时难以进行定性鉴定，需借助质谱、红外和化学法等配合又较为复杂。在液相柱色谱系统中加上高压液流系统，使流动相在高压下快速流动可以提高分离效果，称之为高效液相色谱法。

根据目前的行业标准，含有生长调节成分的饲料产品必须控制含量，违规添加过量的吲哚丁酸添加剂突显“营养效果”会对饲料质量安全、生态环境以及人体健康造成严重的潜在威胁。但目前缺乏一种高精度、灵敏度高、稳定性好且快速便捷的测定方法，应用于测定饲料添加剂中的吲哚丁酸含量。

发明内容

鉴于以上所述现有方法的局限，本发明的目的在于提供一种基于高效液相色谱法的饲料添加剂测定方法及系统，选择高效液相色谱仪在190-490 nm波段内检测饲料添加剂样品的离心上清溶液，在全波段检测并经PDA检测器扫描获得多波长下的色谱图。利用多波长拟合消除杂质峰干扰和吸收峰的拖尾现象，提高单波长下的测量灵敏度和检测精度的同时，避免了多次平行测定校正测量结果的繁琐过程。基于高效液相色谱法的饲料添加剂测定方法及系统，具有测定范围宽，基质干扰小，色谱分离效果好等优点，且快速定量准确，提高了测定饲料添加剂中的吲哚丁酸含量的检测精度，有望为评定饲料产品质量安全提供技术支撑。

为了实现上述目的，根据本发明的一方面，提供一种基于高效液相色谱法的饲料添加剂测定方法，所述方法包括以下步骤：

S100，待测饲料添加剂取样，配制样品溶液，利用高效液相色谱仪在多波长范围内测定获得多波长样品色谱序列；

S200，配制标准溶液，以及质量浓度呈梯度变化的标准工作溶液；利用高效液相色谱仪在多波长范围内测定获得多波长标准色谱序列；

S300，根据所述多波长标准色谱序列，确定标准溶液的最大吸收波长和可允许均方误差；

S400，利用高效液相色谱仪在所述最大吸收波长时，分别测定所述标准工作溶液获得质量浓度标准色谱线性曲线；

S500，获得所述多波长样品色谱序列中最大吸收波长下的样品色谱图，进行多波长拟合获得样品拟合吸收色谱图；

S600，根据所述质量浓度标准色谱线性曲线和样品拟合吸收色谱图，计算得到待测饲料添加剂的浓度含量。