[发明专利]一种含开环核苷结构的起始加帽寡核苷酸引物

权利要求书

1.一种含开环核苷结构的起始加帽寡核苷酸引物，其特征在于，其包含以下结构：

其中，R₁和R₂独立的为H、OH、烷基、O-烷基、卤素；

X₁、X₂和X₃分别独立的为O、CH₂或NH；

Y₁、Y₂和Y₃分别独立的为O、S、Se或BH₃；

R_a和R_b独立的为

R₃和R₄独立的为氢、羟基、取代或未取代的O-烷基、取代或未取代的S-烷基、取代或未取代的NH-烷基、取代或未取代的N-二烃基、取代或未取代的O-芳香基、取代或未取代的S-芳香基、取代或未取代的NH-芳香基、取代或未取代的O-芳烷基、取代或未取代的S-芳烷基、取代或未取代的NH-芳烷基；

B₁和B₂独立的为天然的、或修饰的、或非天然的核苷碱基。

2.权利要求1所述的含开环核苷结构的起始加帽寡核苷酸引物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)m7UrGDP-Im的合成：从鸟苷出发合成糖环开环核苷，在开环核苷的基础上依次进行二磷酸化、N7的甲基化、多磷酸的咪唑化反应，合成m7UrGDP-Im；(2)磷酸酯键连接的二核苷酸的制备：通过开环或非开环的亚磷酰胺单体与开环或非开环的双取代核苷单体，在四氮唑的作用下偶联形成第一个磷酸酯键，通过酸作用，脱除保护基，然后引入第二个磷酸，最终水解得到磷酸酯键连接的二核苷酸；(3)含开环核苷结构的起始加帽寡核苷酸引物的合成：m7UrGDP-Im与磷酸酯键连接的二核苷酸反应制备含开环核苷结构的起始加帽寡核苷酸引物；

所述亚磷酰胺单体结构式为：

其中，R₅和R₆独立的为H、OH、烷基、O-烷基、卤素；B₃和B₄独立的为天然的、或修饰的、或非天然的核苷碱基。