[发明专利]一种细胞系统及其应用、以及激活广谱癌细胞特异性T细胞的方法

说明书

本发明涉及一种细胞系统及其应用、以及激活广谱癌细胞特异性T细胞的方法，细胞系统包括从肿瘤浸润淋巴细胞中提取的癌细胞特异性T细胞，提取包括将肿瘤浸润淋巴细胞或肿瘤浸润淋巴细胞中的T细胞、抗原提呈细胞与负载癌细胞全细胞抗原的纳米粒子和/或微米粒子共孵育以激活癌细胞特异性T细胞，再将被激活的癌细胞特异性T细胞从肿瘤浸润淋巴细胞中分离的步骤。本发明克服了临床上目前无法有效筛选肿瘤浸润淋巴细胞中广谱和多克隆的癌细胞特异性T细胞的难题，能够从肿瘤浸润淋巴细胞中分离广谱的具有特异性肿瘤杀伤功能的效应性癌细胞特异性T细胞，且具有易分离获取和特异性高的特点，可用于癌症的预防和治疗。

技术领域

本发明涉及免疫治疗领域，尤其涉及一种细胞系统及其应用、以及激活广谱癌细胞特异性T细胞的方法。

背景技术

肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TILs)是一类从肿瘤组织中分离出的浸润淋巴细胞，主要以T细胞、B细胞、巨噬细胞和NK细胞为代表，是肿瘤微环境的重要组成部分，在肿瘤的免疫应答中具有核心作用，严重影响肿瘤患者的治疗和预后。其中，T细胞尤其是癌细胞特异性T细胞发挥着抗癌主力军的作用。T细胞是机体特异性识别和杀灭癌细胞的主要细胞，每一种癌细胞特异性T细胞的克隆可以特异性识别一种抗原表位。癌症患者体内尤其是经过免疫治疗或者放疗的患者体内都含有一定数量的癌细胞特异性T细胞。

研究显示，能够浸润到肿瘤部位的淋巴细胞，尤其是癌细胞特异性T细胞越多，肿瘤组织就越能被较好的控制。但是，不同类型的TILs在各类肿瘤的亚型中作用均不相同。其中，既有正向调节、发挥免疫监视作用的细胞，如CD8⁺TIL、NK细胞、CD4⁺Th1细胞等，又有负向调节、发挥免疫耐受作用的细胞，如CD4⁺Th2细胞、调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)。因此，浸润到肿瘤部位的很多淋巴细胞并不一定发挥抗癌功效，比如2型巨噬细胞反而会促进肿瘤的生长，调节性T细胞尤其是癌症特异性调节性T细胞也会促进癌症生长。

肿瘤患者的TILs由于包括以上因素在内的各种原因受到了抑制，不能有效杀伤肿瘤，因此人们希望通过一些体外培养方法将TIL细胞富集起来，再回输给患者，发挥抗肿瘤作用，即TIL细胞疗法。利用肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)治疗癌症的疗法已经发展多年，但是仍面临着如何更好地筛选杀伤性癌细胞特异性T细胞的问题(尤其是分选出广谱的癌细胞特异性T细胞的问题)。目前的方法主要是从处理的肿瘤组织中分离出T细胞等进行体外扩增后回输给患者使用。但是肿瘤浸润的T细胞很多并不都是肿瘤特异性的T细胞，而且很多肿瘤特异性的T细胞为调节性T细胞(Treg)或者耗竭失能的T细胞，并不能有效识别和杀伤癌细胞，所以即使机体分离扩增后回输给患者后效果也相对有限。而且，如果将Treg体外扩增后回输给患者反而会引起肿瘤组织生长更快。所以如何能够从肿瘤浸润淋巴细胞中筛选得到肿瘤特异性T细胞中的具有癌细胞识别和杀伤功能的效应性癌细胞特异性T细胞就显得非常关键，但是目前没有特别高效的手段可以很好地从肿瘤浸润淋巴细胞中分离该部分具有特异性肿瘤杀伤功能的效应性癌细胞特异性T细胞。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种来源于肿瘤浸润淋巴细胞的细胞系统，使用负载癌细胞全细胞抗原的纳米粒子或微米粒子先体外激活效应性癌细胞特异性T细胞，然后再利用被激活的效应性癌细胞特异性T细胞特异性表达的标志物分离提取上述癌细胞特异性T细胞，回输给患者预防或者治疗癌症，有效地解决了如何从肿瘤浸润淋巴细胞中特异性分离提取具有识别和杀伤癌细胞能力的广谱和多克隆的癌细胞特异性T细胞的问题。