[发明专利]一种具有抗炎抗氧化活性的忧遁草多肽及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种具有抗炎抗氧化活性的忧遁草多肽，其特征在于：所述忧遁草多肽的氨基酸序列为Asp-Lys-Phe-Glu-Asp-Asn-Leu-Tyr-Ser-Ala-His。

2.一种以忧遁草为原料制备权利要求1所述忧遁草多肽的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）将忧遁草粉碎，按料液比1：10 m/v加入蒸馏水，于25℃超声提取35 min，随后过滤，收集滤液；

2）将步骤1）所述滤液用碱调节剂调节至pH值为8.0，室温下搅拌30 min后离心，收集上清液；其中，所述碱调节剂为1 mol/L NaOH；

3）将步骤2）所述上清液用酸调节剂调节至pH值为3.0，随后离心，收集沉淀；其中，所述酸调节剂为1 mol/L HCl；

4）将步骤3）所述沉淀溶解于pH8.4的Tris-盐酸缓冲液后用截留分子量3500 Da的透析袋在去离子水中进行透析，冷冻干燥得到忧遁草粗蛋白；

5）将步骤4）所述忧遁草粗蛋白溶解于pH8.4的Tris-盐酸缓冲液后进行DEAE-Sepharose离子交换层析，洗脱液为含0.2~1 M NaCl的pH8.4的Tris-盐酸缓冲液，流速1mL/min，利用层析图谱采集分析仪获得经DEAE-Sepharose分离纯化后产物的峰图，收集具有最高抗氧化活性的组分CNPH-Ⅲ；

6）利用反相高效液相色谱RP-HPLC对步骤5）所述CNPH-Ⅲ进行进一步分离纯化，色谱柱为Thermo C18色谱柱，214 nm下检测，进样量为20 μL，进样浓度为10 mg/mL，流动相流速1mL/min，流动相A为含0.1%TFA的乙腈，流动相B为含0.1%TFA的去离子水，洗脱梯度为：0-5min，5%-10%A；5-15 min，10%-50%A；15-35 min，50%-80%A，收集保留时间为3-4 min的洗脱峰CNPH-Ⅲ-2，真空冷冻干燥后保存于-80℃；

7）采用液相色谱质谱联用仪对步骤6）所述洗脱峰CNPH-Ⅲ-2所包含的肽段进行氨基酸序列测定，对测定得到的氨基酸序列进行Fmoc固相合成，从而得所述忧遁草多肽。

3.如权利要求1所述的忧遁草多肽在制备具有抗炎功能的食品、保健品、化妆品或药物中的应用。

4.如权利要求1所述的忧遁草多肽在制备具有抗氧化功能的食品、保健品、化妆品或药物中的应用。