[发明专利]一种三肽-29的生产工艺

权利要求书

1.一种三肽-29的生产工艺，其特征在于，以脯氨酸、氯乙酰氯、氨水、Fmoc-Cl、对硝基苯酚、DIC、羟脯氨酸为原料，

首先脯氨酸与氯乙酰氯在碱性条件下反应制得中间体-1 Mca-Pro-OH，中间体-1的合成如下：向一容器中加入脯氨酸Pro、水、有机溶剂，有机溶剂采用甲苯、乙酸乙酯、THF、乙腈、1,4-二氧六环中的至少一种，保持温度-5-0℃，向料液中滴加氯乙酰氯和有机溶剂的混合溶液，加料和滴加过程中保持体系pH在8.5-9.0，反应完后，保持温度0-5度，调节料液pH为2.0±0.2，搅拌、抽滤，滤饼洗涤、干燥，得Mca-Pro-OH；

然后中间体-1与氨水反应制得中间体-2 H-Gly-Pro-OH，中间体-2的合成如下：向一容器中加入Mca-Pro-OH及浓氨水，搅拌，反应完全后，加热浓缩反应液，得到H-Gly-Pro-OH；

再将中间体-2与Fmoc-Cl在碱性条件下反应制得中间体-3 Fmoc-Gly-Pro-OH，中间体-3的合成如下：向一容器中加入H-Gly-Pro-OH及水、有机溶剂，有机溶剂采用甲苯、乙酸乙酯、THF、乙腈、1,4-二氧六环中的至少一种,温度保持在0到10℃，滴加Fmoc-Cl的有机溶剂溶液，保持料液pH在8.5-9，反应完全后，加热浓缩去除其中的有机溶剂，然后降温至常温，调节料液pH为2.0±0.2，析料、过滤、烘干，得到Fmoc-Gly-Pro-OH；

中间体-3经与对硝基苯酚、DIC反应制得中间体-4 Fmoc-Gly-Pro-ONp，中间体-4的合成如下：向一容器中加入Fmoc-Gly-Pro-OH、HONP及有机溶剂，温度保持0到10度，滴加DIC的有机溶剂溶液，滴加完后，升温至20-25度，反应完全后，得到Fmoc-Gly-Pro-ONp；

中间体-4再与羟脯氨酸反应制得中间体-5 Fmoc-Gly-Pro-Hyp-OH，中间体-5的合成如下：向Fmoc-Gly-Pro-ONp中加入水、羟脯氨酸，保持温度5-10度，控制料液pH为8.5-9.0，待Fmoc-Gly-Pro-ONp反应完，加热浓缩反应液，然后将料液温度降至0度以下，调节料液pH为2.0±0.2，析料、过滤、烘干，得到Fmoc-Gly-Pro-Hyp-OH；

最后中间体-5经水解并用结晶溶剂结晶得到三肽-29 H-Gly-Pro-Hyp-OH，中间体-5的水解反应如下：将Fmoc-Gly-Pro-Hyp-OH 置于一容器中，加入水、有机溶剂，有机溶剂采用甲苯、乙酸乙酯、THF、乙腈、1,4-二氧六环中的至少一种，温度保持45-50度，控制料液pH为12.0-12.5，反应完全后，将料液pH调为8.0±0.2，加热浓缩去除有机溶剂，然后将料液pH调为8.5-9.0，加入萃取溶剂萃取杂质，萃取溶剂采用乙酸乙酯、乙酸丁酯、甲叔醚、DCM中的至少一种，水相pH调至3.0±0.2，加热浓缩反应液，经脱盐后，用结晶溶剂结晶，过滤、烘干，得到三肽-29 H-Gly-Pro-Hyp-OH；结晶溶剂采用甲醇与惰性溶剂的混合物，其中惰性溶剂采用乙醚、乙腈、乙醇、乙酸乙酯中的至少一种，结晶溶剂采用甲醇与乙醚以体积比为2:1的混合物，或甲醇与乙腈以1:2的混合物，或甲醇与乙醇以1:3的混合物，或甲醇与乙酸乙酯以1:1的混合物。