[发明专利]一种茶叶中氨基酸的检测方法在审
申请号: | 202210443258.3 | 申请日: | 2022-04-21 |
公开(公告)号: | CN114965745A | 公开(公告)日: | 2022-08-30 |
发明(设计)人: | 蔡杰;张娜;叶园园 | 申请(专利权)人: | 武汉轻工大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86 |
代理公司: | 深圳市世纪恒程知识产权代理事务所 44287 | 代理人: | 吴士卿 |
地址: | 430000 湖北省*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 茶叶 氨基酸 检测 方法 | ||
1.一种茶叶中氨基酸的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
将茶叶样品分散在酸中,水解反应得到水解产物;
取所述水解产物,加入2,4-二硝基氟苯衍生化剂,在55~65℃、暗处的条件下进行反应,得到检测样品;
取所述检测样品,通过高效液相色谱系统,检测得到所述检测样品中的氨基酸的含量。
2.如权利要求1所述的茶叶中氨基酸的检测方法,其特征在于,在所述高效液相色谱系统中,检测波的波长为360nm。
3.如权利要求1所述的茶叶中氨基酸的检测方法,其特征在于,在所述高效液相色谱系统中,
色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料;
梯度洗脱所用流动相包括流动相A和流动相B,所述流动相A包括乙腈,所述流动相B包括乙酸钠;
进样量为1~30μL;
流速为0.8~1.2mL/min;以及,
柱温为22~30℃。
4.如权利要求3所述的茶叶中氨基酸的检测方法,其特征在于,所述十八烷基硅烷键合硅胶的粒度为0.7~5μm;和/或,
所述乙腈的浓度为90~100%;和/或,
所述乙酸钠的浓度为0.01~0.1mol/L;和/或,
所述乙酸钠的pH值为5.2~5.4。
5.如权利要求1所述的茶叶中氨基酸的检测方法,其特征在于,在所述高效液相色谱系统中,梯度洗脱程序包括:
0~1min,流动相A:16%、流动相B:84%;
15~22min,流动相A:20%、流动相B:80%;
25~35min,流动相A:31%、流动相B:69%;
42~45min,流动相A:36%~72%、流动相B:64%~28%;
50~55min,流动相A:85%、流动相B:15%;
56~60min,流动相A:16%、流动相B:84%。
6.如权利要求1所述的茶叶中氨基酸的检测方法,其特征在于,将茶叶样品分散在酸中,水解反应得到水解产物的步骤包括:
将茶叶粉碎,获得茶叶样品,将所述茶叶样品分散在盐酸溶液中,在110~120℃的条件下,水解23~25h,赶酸蒸发定容过滤,获得水解产物。
7.如权利要求6所述的茶叶中氨基酸的检测方法,其特征在于,所述茶叶样品与所述盐酸溶液的体积比为1:(0.10~0.12);和/或,
所述盐酸溶液的浓度为5~6mol/L。
8.如权利要求1所述的茶叶中氨基酸的检测方法,其特征在于,取所述水解产物,加入2,4-二硝基氟苯衍生化剂,在55~65℃、暗处的条件下进行反应,得到检测样品的步骤包括:
取所述水解产物,加入2,4-二硝基氟苯衍生化剂,在55~65℃、暗处的条件下反应50~70min,冷却至20~30℃,定容静置过滤,获得检测样品。
9.如权利要求1所述的茶叶中氨基酸的检测方法,其特征在于,所述水解产物与所述2,4-二硝基氟苯衍生化剂的体积比为(2~3):1。
10.如权利要求1所述的茶叶中氨基酸的检测方法,其特征在于,取所述检测样品,通过高效液相色谱法,检测得到所述检测样品中的氨基酸的含量的步骤包括:
通过高效液相色谱系统获得氨基酸混标液的色谱图,以色谱峰保留时间定性,通过所述高效液相色谱系统获得所述检测样品的色谱图,根据所述氨基酸混标液中的色谱图中的色谱峰保留时间对所述检测样品定性,以各色谱峰的面积代入标准曲线方程中计算出所述检测样品中的氨基酸的含量。
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