[发明专利]一种藿香正气水抗SARS-CoV-2的质量标志物筛选方法

权利要求书

1.一种藿香正气水抗SARS-CoV-2的质量标志物筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备供试品溶液：称取适量样品，乙醇溶液稀释并定容，涡旋混匀，取适量经微孔滤膜过滤，制得供试品溶液；

(2)建立UPLC-Q-TOF-MS指纹图谱并标定共有峰：将步骤(1)供试品溶液经超高效液相色谱分离和高分辨质谱检测，采集的UPLC-Q-TOF-MS数据以cdf格式导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”进行分析，设定时间窗宽度为0.1min，对藿香正气水谱图进行多点校正后自动峰匹配，标定共有峰；

(3)对共有峰进行鉴定：将步骤(2)采集的UPLC-Q-TOF-MS数据，导入到化合物鉴定软件中，与线上线下天然活性化合物数据库进行匹配，并使用相应对照品确证；

(4)采用化学计量学分析方法筛选共有峰中的差异性成分；

(5)将步骤(4)差异性成分与SARS-CoV-2靶标蛋白进行分子对接，筛选藿香正气水潜在活性成分，作为藿香正气水抗SARS-CoV-2的质量标志物。

2.根据权利要求1所述的一种藿香正气水抗SARS-CoV-2的质量标志物筛选方法，其特征在于，所述的供试品溶液制备方法为：取藿香正气水样品1.0mL于10mL容量瓶中，加入50％乙醇溶液定容至刻度，涡旋混匀，取适量过0.22μm滤膜，即得供试品溶液。

3.根据权利要求1所述的一种藿香正气水抗SARS-CoV-2的质量标志物筛选方法，其特征在于，所述的超高效液相色谱分离条件为：色谱柱选用规格为100mm×2.1mm，1.8μm的AcquityHSS T3色谱柱；柱温为45℃；流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为乙腈，梯度洗脱；梯度洗脱的条件为0～7min，90～80％A；7～30min，80～50％A；30～35min，50～10％A；35～37min，10％A；37～37.1min，10～90％A；37.1～40min，90％A；流速为0.3mL/min；进样量为5μL。

4.根据权利要求1所述的一种藿香正气水抗SARS-CoV-2的质量标志物筛选方法，其特征在于，所述的高分辨质谱检测条件为：离子源为ESI+；离子源温度为100℃；脱溶剂气温度为550℃；脱溶剂气流速为600L/h；锥孔气流速为50L/h；毛细管电压为2.0kV；锥孔电压为40V；工作模式：MS^E模式；扫描模式：灵敏度模式；扫描范围：m/z 50～1000；低碰撞能量为off，高碰撞能量为20～40eV；扫描时间为1.0s。

5.根据权利要求1所述的一种藿香正气水抗SARS-CoV-2的质量标志物筛选方法，其特征在于，所述的共有峰鉴定结果为：1号峰为槟榔次碱，保留时间为0.85min；6号峰为甘草苷，保留时间为6.35min；8号峰为新甘草苷，保留时间为7.76min；9号峰为橙皮苷，保留时间为8.94min；13号峰为氧化前胡素，保留时间为12.50min；14号峰为新比克白芷内脂，保留时间为13.30min；15号峰为甜橙素，保留时间为18.40min；18号峰为甘草酸，保留时间为21.64min；19号峰为川陈皮素，保留时间为22.94min；20号峰为3，5，6，7，8，3’，4’-七甲氧基黄酮，保留时间为24.60min；21号峰为桔皮素，保留时间为25.32min；22号峰为欧前胡素，保留时间为27.10min；23号峰为珊瑚菜素，保留时间为28.88min；24号峰为厚朴酚，保留时间为31.69min。

6.根据权利要求1所述的一种藿香正气水抗SARS-CoV-2的质量标志物筛选方法，其特征在于，所述的化学计量学分析方法包括层次聚类分析和主成分分析。

7.根据权利要求1所述的一种藿香正气水抗SARS-CoV-2的质量标志物筛选方法，其特征在于，所述的分子对接以SARS-CoV-2主蛋白Mpro作为筛选靶标，以瑞德西韦作为阳性对照。