[发明专利]一种用于骨关节炎治疗的长效透明质酸及其制备方法

说明书

本发明涉及一种用于骨关节炎治疗的长效透明质酸及其制备方法。具体地，其制备方法为：将枝化大分子、巯基化透明质酸和溶剂共混改性制备得到，枝化大分子中的双键与透明质酸上的巯基官能团发生迈克尔加成反应得到所需要的透明质酸改性产物；再通过透析法将混合液中未反应的枝化大分子去除，冷冻干燥，得到改性透明质酸产品。本发明制备的改性透明质酸产品生物相容性好，可应用于骨关节炎的治疗，并且具有抗酶解、可实现体内长效停留的优点，改性过程不形成凝胶，改性透明质酸依然保持良好的可注射性。

技术领域

本发明属于透明质酸改性技术领域，具体涉及一种用于骨关节炎治疗的长效透明质酸及其制备方法。

背景技术

透明质酸是由D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺为双糖单位聚合而成的高黏弹性的大分子糖胺聚糖，具有独特的理化性质和广泛的生理学功能，如：保湿作用、调节炎症反应、润滑关节保护软骨、促进伤口愈合等，在医疗美容、骨科治疗、眼科治疗等领域有着广泛的应用。

透明质酸体内应用时会受到透明质酸酶的作用而迅速降解，存留时间较短。因此，相对于小分子量透明质酸，超高分子量透明质酸(Mw大于1000kDa)因其降解速度相对较慢，在微创填充物、骨关节炎治疗等应用场景具有独特优势。然而，由于这类高分子透明质酸为链状开放结构，易于与酶发生作用而降解，因此在体内停留时间依然不理想。为解决该问题，研究者提出对透明质酸分子进行交联制备高分子凝胶，以弥补其体内存留时间过短的问题。例如，专利CN111440334A公开了一种可注射透明质酸基水凝胶的制备方法，通过改性的含氨基的透明质酸与含多个醛基的交联剂之间的席夫碱反应反应，形成一种机械强度以及降解速率可控的透明质酸水凝胶材料。其他的常用的透明质酸交联剂包括：BDDE(丁二醇缩水甘油醚)、GMA(甲基丙烯酸缩水甘油醚)、DVS(二乙烯基砜)等。然而，这类透明质酸交联剂往往毒性较大，并且成胶后也会造成其可注射性显著下降，限制了其应用。因此，急需开发一种可提高体内停留时间，利于其体内应用的长效透明质酸。

发明内容

发明目的：针对上述现有技术存在的问题，本发明的目的是提供一种用于骨关节炎治疗的长效透明质酸，可提高透明质酸体内停留时间，利于其体内应用；本发明的第二目的是提供一种用于骨关节炎治疗的长效透明质酸的制备方法。

技术方案：本发明提供一种用于骨关节炎治疗的长效透明质酸，由枝化大分子、巯基化透明质酸和溶剂共混改性制备得到；所述枝化大分子为乙烯基端基的聚乙二醇高分子，所述的溶剂为水或PBS缓冲液。

进一步的，所述的乙烯基端基的聚乙二醇高分子为树形聚乙二醇((mPEG)4-(PEG)2-MAL)，二臂聚乙二醇((Propargyl-PEG)2-Allyl)、三臂聚乙二醇(3Arm(PEG-Allyl)3)、四臂聚乙二醇(4Arm(PEG-Allyl)4)、六臂聚乙二醇(6Arm-PEG-DA)、八臂聚乙二醇马来酰亚胺(8Arm-PEG-MAL)，支化聚乙二醇二丙烯酸酯(HB-PEGDA)中的一种或几种。

进一步的，所述的巯基化透明质酸是通过化学方法将巯基接枝到透明质酸链上的功能高分子材料，分子量为5kDa～3000kDa，巯基的取代率为0.1～2.0mmol/g。

本发明的用于骨关节炎治疗的长效透明质酸的制备方法，具体制备步骤如下：

(1)将枝化大分子加入溶剂中搅拌溶解得到浓度范围为0.5％～5％(w/v)的溶液，优选浓度为4％；

(2)巯基化透明质酸加入溶剂中搅拌溶解得到浓度范围为0.1％～1％(w/v)的溶液；

(3)将步骤(1)与步骤(2)制得的溶液按比例共混改性制得透明质酸改性产物；

(4)将步骤(3)制得的透明质酸改性产物经透析与未反应的枝化大分子分离纯化；

(5)将分离后的透明质酸改性产物冷冻干燥得到用于骨关节炎治疗的长效透明质酸。