[发明专利]适于ONT测序平台的用于感样本中鼻病毒检测的靶向区段和引物组及其应用

权利要求书

1.一种适于ONT测序平台的、且用于感染样本中鼻病毒检测的靶序列，其特征在于，所述引靶序列同时包含人鼻病毒的5’NCR和VP基因序列，所述靶序列如SEQ IDNO.15-16所示序列。

2.一种适于ONT测序平台的感染样本中鼻病毒检测的引物组合，其特征在于，所述引物针对人鼻病毒的5’NCR和VP基因序列，所述引物组合包括如下引物：

(1)HRV-A引物：

正向引物：CGGTAMCYTTGTRCGCCWGTT(SEQ ID NO.1)；

反向引物：ARDGCATCSGGBARYTTCCACC(SEQ ID NO.2)；

(2)HRV-C引物：

正向引物:GKWCAAGYACTTCTGTTTCCC(SEQ ID NO.3)；

反向引物:GGTGWTCKTGGAATCCATGCT(SEQ ID NO.4)；

其中，M,Y,R,W,S,B,D为简并碱基，遵从简并碱基密码表，M(A/C),K(G/T),Y(C/T),R(A/G),W(A/T),S(G/C),B(G/T/C),D(G/A/T)。

3.根据权利要求2所述的引物组合，其特征在于，所述引物扩增的人鼻病毒的5’NCR和VP基因序列如SEQ ID NO.15-16所示。

4.权利要求2-3任一所述的引物组合，其特征在于，所述(1)HRV-A和(2)HRV-C引物序列分别如下：

HRV-A引物：

正向引物F.1:CGGTAACTTTGTACGCCAGTT(SEQ ID NO.5)

反向引物R.1:AGGGCATCCGGCAATTTCCACC(SEQ ID NO.6)

正向引物F.2:CGGTAACCTTGTACGCCAGTT(SEQ ID NO.7)

反向引物R.2:AGGGCATCCGGTAATTTCCACC(SEQ ID NO.8)

正向引物F.3:CGGTAACTTTGTACGCCAGTT(SEQ ID NO.9)

反向引物R.3:AGTGCATCCGGCAATTTCCACC(SEQ ID NO.10)

HRV-C引物：

正向引物F.4:GGACAAGCACTTCTGTTTCCC(SEQ ID NO.11)

反向引物R.4:GGTGTTCTTGGAATCCATGCT(SEQ ID NO.12)

正向引物F.5:GGTCAAGTACTTCTGTTTCCC(SEQ ID NO.13)

反向引物R.5:GGTGTTCGTGGAATCCATGCT(SEQ ID NO.14)。

5.根据权利要求2-4任一所述引物组合，其特征在于，所述引物能够特异性扩增人鼻病毒基因，同时能够兼容性扩增种属内不同序列的人鼻病毒，保证种属特异和种内兼容。

6.一种适于ONT测序平台的、且用于感染样本中鼻病毒检测的检测试剂盒，其特征在于包含权利要求1-4任一所述引物组合，或权利要求5所述的靶序列。

7.权利要求1-4任一所述的引物组合或权利要求5所述的靶序列在制备适于ONT测序平台的、且用于感染样本中鼻病毒检测的检测试剂盒种的应用。

8.权利要求1-4任一所述的引物组合或权利要求5所述的靶序列在感染样本鼻病毒检测中的应用。

9.一种基于ONT测序平台的感染样本鼻病毒检测方法，其特征在于，包含利用权利要求1-4任一所述引物组合或权利要求6所述试剂盒对感染样本DNA进行扩增的步骤。

10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，进一步包括测序和生信分析步骤。