[发明专利]一种珍珠油杏抗氧化肽APHs-1-c的提取方法及其应用

权利要求书

1.一种珍珠油杏抗氧化肽APHs-1-c的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）称取脱脂杏仁粉置于烧杯中，加入去离子水，调pH值为8，超声提取，然后将提取液离心，留上清液；将所得的上清液调节pH值至4.5，静置，再次离心，收集沉淀后水洗，将沉淀置于真空冷冻干燥机中冻干获得杏仁蛋白；

（2）称取杏仁蛋白溶于去离子水配置成蛋白质溶液，水浴预热，之后加入蛋白酶，酶解，过程中保持蛋白液pH不变，；酶解完成后，终止反应，然后离心，取上清液，真空冷冻干燥得杏仁多肽粉，记为APHs；

（3）将APHs依次经过截留分子量为3 kDa，10 kDa的切向错流膜分离，得到三个组分，收集三个组分并冻干，分别记作APHs-1、APHs-2、APHs-3；

（4）使用Sephadex G-25作为柱层析填料对APHs-1进行分离，在220 nm波长下，按出峰顺序命名为APHs-1-a、APHs-1-b、APHs-1-c；洗脱多次分别收集三个组份的洗脱液，真空冷冻干燥后即可，收集最终目标物APHs-1-c。

2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤（1）中，所述脱脂杏仁粉和去离子水的液料比为25-35：1；所述超声提取的条件为：功率200-300W，时间20-40min；所述离心为7000 r/min条件下离心20 min；所述再次离心为7000 r/min条件下离心15min。

3.根据权利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，步骤（2）中，所述蛋白质溶液的质量分数为2%；所述水浴预热至70℃；所述蛋白酶为中性蛋白酶，复合蛋白酶，碱性蛋白酶，风味蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一种或几种；所述酶的加入量为4-6%；所述酶解的温度为45-55℃、pH为6.0-10.0、酶解时间为6h；所述终止反应为100℃下加热15min；所述离心为7000 r/min条件下离心20 min。

4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤（3）中，所述APHs-1、APHs-2、APHs-3的分子量分别为3 kDa、3 kDa~10 kDa、10 kDa。

5.一种如权利要求1所述的珍珠油杏抗氧化肽APHs-1-c在制备抗氧化产品中的应用。