[发明专利]一种靶向CD155的CAR结构设计及其应用

说明书

本申请属于肿瘤免疫治疗技术领域，具体涉及一种靶向CD155的CAR结构设计及其应用专利申请事宜。该CAR序列包括依次连接的人源TIGIT胞外区序列、CD8信号传导片段、以及CD28或41BB刺激信号分子，结构式分别命名为：CD155‑28z‑CAR或者CD155‑BBz‑CAR。本申请中，发明人以CD155作为目标靶点，设计了新的CAR结构。基于此CAR结构设计，发明人进一步制备了靶向CD155的重组慢病毒表达质粒，进一步地T细胞转染和相关初步实验结果表明，相关CAR结构设计能有效刺激肿瘤细胞产生大量效应因子IL‑2和IFN‑γ，表明该CAR结构对相关肿瘤尤其是实体瘤的防治具有较好应用前景。

技术领域

本申请属于肿瘤免疫治疗技术领域，具体涉及一种靶向CD155的CAR（ChimericAntigen Receptor，嵌合抗原受体）结构设计及其应用专利申请事宜。

背景技术

肿瘤防治中，基于免疫系统的CAR-T（Chimeric Antigen Receptor T-Cell，嵌合抗原受体T细胞）治疗方式，因其副作用小、适应症广泛等技术优势，近年来得到了较多研究和发展。

现有技术中，以CD19为靶点，利用CAR-T细胞来定向清除CD19⁺肿瘤细胞已在非实体瘤的急性淋巴细胞白血病(ALL)的治疗中表现出较好防治效果。但是CAR-T技术在实体瘤中的应用目前尚不尽人意，还有许多问题需要解决，其中一个重要技术问题就是寻找在实体肿瘤中特异表达的靶点抗原。

针对细胞表面表达分子相关研究表明，CD155作为一种免疫球蛋白样粘附分子，属于Nectin样分子家族中的第五个成员，其参与了细胞运动、自然杀伤和T细胞以及NK细胞介导的免疫过程。作为共刺激受体CD226和天然杀伤细胞和T细胞上的共抑制受体TIGIT和CD96的配体，CD155通过与包括TIGIT、CD226和CD96在内的多种配体相互作用在免疫中发挥双重作用。

已有研究表明，CD155在人的各种正常组织中很少或弱表达，但在多种人类恶性肿瘤中存在过度表达现象，对肿瘤的增殖转移有明显的促进作用，并与患者不良预后相关。基于这一特点，将CD155作为目标靶点，进而开发一种CAR-T细胞治疗方法，则有望拓展CAR-T技术在实体瘤治疗中的应用范围以及进一步改善肿瘤的治疗效果是具有十分重要的技术意义的。

发明内容

针对CD155靶点，本申请目的在于提供一种新的CAR结构设计，从而为相关实体瘤的防治奠定一定技术基础。

本申请所采取的技术方案详述如下。

一种靶向CD155的CAR结构设计，该CAR序列包括依次连接的人源TIGIT胞外区序列、CD8信号传导片段、以及CD28或41BB刺激信号分子，具体结构式分别命名为：CD155-28z-CAR或者CD155-BBz-CAR；具体说明如下。

（1）CD155-28z-CAR结构：

包括依次连接的：人CD8a分子信号肽(Leading signal，CD8a)、人源TIGIT胞外区（人源CD155胞外区）、人CD8a分子柔性片段(CD8Hinge)、人CD28分子跨膜区与胞内区(CD28)，人CD3z分子胞内区(CD3z)；其蛋白总长为388个氨基酸，具体氨基酸序列如SEQ IDNo.1所示，具体如下：