[发明专利]一株内生球毛壳菌MG2及其在防治苹果树腐烂病的应用

说明书

本发明属于植物病害生物防治技术领域，公开了一株内生球毛壳菌MG2及其在防治苹果树腐烂病的应用，所述内生球毛壳菌MG2已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号为：CGMCCNo.40070；所述内生球毛壳菌MG2是从健康木瓜海棠树皮中分离得到，经过鉴定确定为球毛壳菌，置于4℃小斜面保存。实验结果表明，本发明的内生球毛壳菌抑制了腐烂病菌的孢子萌发，发酵液具有良好的热稳定性；球毛壳菌发酵液具有良好的热稳定性和紫外线稳定性，可以应用于田间；球毛壳菌及其发酵液对苹果离体枝条均有一定的保护和治疗效果，但其保护作用优于治疗作用，为后期生产球毛壳菌预防保护制剂奠定基础。

技术领域

本发明属于植物病害生物防治技术领域，尤其涉及一株内生球毛壳菌MG2及其在防治苹果树腐烂病的应用。

背景技术

我国是世界第一苹果生产国，苹果产业是推进乡村振兴、巩固脱贫攻坚成果的重要支柱产业。然而，由真菌苹果黑腐皮壳(Valsamali)引起的苹果树腐烂病却一直威胁着该产业的健康发展。腐烂病是苹果最具毁灭性的枝干病害，常造成枝枯树死，严重时甚至毁园，带来巨大的经济损失。目前，对于苹果树腐烂病的防治主要还依赖化学药剂，由于化学杀菌剂特别是内吸性杀菌剂长期而广泛的使用，导致病原菌抗药性问题日益突出。亟需通过综合防治尤其是与生物防治相结合，来克服其抗药性的问题，从而对苹果树腐烂病进行有效控制。但是，目前生物防治真菌资源多数尚处于研究与开发的初始阶段，远远满足不了生产上的实际要求。加之果品农药残留、生态环境污染等问题层出不穷，不利于绿色食品的健康发展。因此大力开发生防微生物资源产品已势在必行。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：

(1)由于化学杀菌剂特别是内吸性杀菌剂长期而广泛的使用，导致苹果树腐烂病菌抗药性增强、生态环境污染和农药残留等问题严重制约着绿色食品的健康发展。

(2)目前生物防治真菌资源多数尚处于研究与开发的初始阶段，尤其缺乏特异性强、防治效果好的生防产品，远远满足不了生产上苹果树腐烂病防治的实际要求。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一株内生球毛壳菌MG2及其在防治苹果树腐烂病的应用。

本发明是这样实现的，一株内生球毛壳菌MG2，所述内生球毛壳菌MG2已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号为：CGMCCNo.40070。

进一步，所述内生球毛壳菌MG2是从健康木瓜海棠(ChaenomelescathayensisSchneid)树皮中分离得到，经过鉴定确定为球毛壳菌，置于4℃小斜面保存。

本发明的另一目的在于提供一种实施所述的内生球毛壳菌MG2的内生球毛壳菌MG2的鉴定方法，所述内生球毛壳菌MG2的鉴定方法包括以下步骤：

步骤一，形态学观察：进行重新活化培养后的拮抗菌株MG2特征的观察；

步骤二，分子生物学鉴定：PCR扩增后构建多基因系统发育进化树。

进一步，所述步骤一中的形态学观察包括：

将平板对峙筛选得到的拮抗菌株MG2重新活化接于PDA培养基上，25℃培养箱中黑暗培养7d，观察生长速度、菌落颜色、形状以及闭囊壳形态特征。

其中，所述PDA培养基的制备方法为：称取去皮马铃薯200g，切成小块双蒸水煮沸至可戳散，四层纱布过滤煮沸液至1L的量杯，加入20g葡萄糖和15g琼脂搅拌均匀后双蒸水定容至1L，封口121℃高压灭菌20min待用。

进一步，所述步骤二中的分子生物学鉴定包括：