[发明专利]一种杀螟硫磷纳米抗体-胶体金标记物的制备方法和应用

权利要求书

1.一种杀螟硫磷纳米抗体-胶体金标记物的制备方法，其特征在于，向胶体金溶液中加入杀螟硫磷纳米抗体，混匀静置，进行封闭，再静置离心，弃上清液，沉淀用胶体金复溶液重悬，即得杀螟硫磷纳米抗体-胶体金标记物；所述胶体金溶液由1％氯金酸和1％柠檬酸三钠体积比为1:2配制得到；所述杀螟硫磷纳米抗体的添加量5～10μg/mL；所述封闭采用10％的牛血清蛋白25～35μL进行封闭反应25～40min；所述胶体金复溶液的配方为：0.02～0.5MBB、BSA:0.1％～2％、蔗糖:1％～15％、曲拉通-100:0.1％～2％、PVP:0.1％～2％。

2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述胶体金溶液pH为6.5～7.5。

3.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，所述胶体金复溶液的配方为：0.2M BB、BSA:0.5％～2％、蔗糖:2％～10％、曲拉通-100:0.5％～2％、PVP:0.2％～1％。

4.权利要求1～3任一所述方法制备得到的杀螟硫磷纳米抗体-胶体金标记物。

5.权利要求4所述杀螟硫磷纳米抗体-胶体金标记物在检测杀螟硫磷农药中的应用。

6.权利要求4所述杀螟硫磷纳米抗体-胶体金标记物在制备检测杀螟硫磷的纳米抗体-胶体金试纸条中的应用。

7.一种检测杀螟硫磷农药的纳米抗体-胶体金试纸条，其特征在于，含有权利要求4所述杀螟硫磷纳米抗体-胶体金标记物。

8.根据权利要求7所述试纸条，其特征在于，试纸条由以下步骤制备得到：

S1.采用权利要求1所述方法制备杀螟硫磷纳米抗体-胶体金标记物；

S2.将结合释放垫用胶体金复溶液浸泡后烘干，并采用步骤S1制备得到的杀螟硫磷纳米抗体-胶体金标记物喷涂在处理过的结合释放垫上，进行烘干后密封干燥保存；

S3.将杀螟硫磷农药半抗原-乳铁球蛋白偶联物包被到反应膜上构成检测线，将兔抗驼抗体包被在反应膜上构成质控线；

S4.将样品吸收垫置于缓冲液中浸泡，烘干后备用；

S5.将样品吸收垫、结合释放垫、反应膜、吸水垫在底板上顺次进行组装，即得检测杀螟硫磷农药的纳米抗体胶体金试纸条。

9.根据权利要求8所述试纸条，其特征在于，步骤S2中采用的杀螟硫磷农药半抗原-乳铁球蛋白偶联物浓度为0.1～0.5mg/mL，包被量为0.5～1.0μL/cm；兔抗驼抗体浓度为0.5～2mg/mL，包被量为0.5～1.0μL/cm。

10.权利要求7所述检测杀螟硫磷农药的纳米抗体-胶体金试纸条在检测杀螟硫磷农药残留中的应用。