[发明专利]一种构建盐吴茱萸高效液相特征图谱的方法及其应用

说明书

本发明提供了一种构建盐吴茱萸高效液相特征图谱的方法，包括以下步骤：分别精密吸取参照物溶液、供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，建立高效液相特征图谱；所述测定的色谱柱为Agilent TC‑C18，以乙腈为流动相A，以0.05wt％～0.15wt％的磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，检测波长为250nm～260nm，理论板数按绿原酸峰计算不低于3000。与现有技术相比，本发明建立了高效液相特征图谱方法用于吴茱萸药材、盐吴茱萸饮片、盐吴茱萸提取物及盐吴茱萸配方颗粒的检测，不仅可用于吴茱萸药材、盐吴茱萸饮片的质量控制，还可用于吴茱萸药材及其炮制品的基原鉴定，并且稳定性好、精密度高、重现性好、便捷且易于掌握。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，更具体地说，是涉及一种构建盐吴茱萸高效液相特征图谱的方法及其应用。

背景技术

盐吴茱萸为芸香科植物吴茱萸Euodia rutaecarpa(Juss.)Benth、疏毛吴茱萸Euodia rutaecarpa(Juss.)Benth.var.bodinieri(Dode)Huang或石虎Euodia rutaecarpa(Juss.)Benth var.offi cinalis(Dode)Huang干燥近成熟果实的加工炮制品。盐吴茱萸味辛、苦、咸，具有散寒止痛，降逆止呕，助阳止泻的功效。用于寒疝腹痛，厥阴头痛，寒湿脚气，经行腹痛，呕吐吞酸，脘腹胀痛，五更泄泻等症状^[3]。盐炙品引药下行，增强疗效；缓和辛燥之性，增强滋阴降火作用^[4]。其化学成分类型较多，包括生物碱、苦味素、挥发油、黄酮、酚酸及其衍生物、蒽醌等类成分，其中生物碱、苦味素类含量较高，为其主要活性成分^[5]。现代药效学研究表明，盐吴茱萸具有抗炎、镇痛、抗菌、强心、舒张血管、增加组织器官血流量、保护胃黏膜、抗肿瘤等作用，且广泛用于复发性口疮、慢性肾功能衰竭、梅尼埃病等疾病的治疗^[6-8]。

《中国药典》2000版^[9]中吴茱萸的炮制品仅收录了甘草制吴茱萸和除去杂质的吴茱萸，《全国中药炮制规范》中收载了盐吴茱萸^[10]，文献报道对炮制品盐吴茱萸及其相关制剂的质量控制方法进行研究较少^[11-13]，且并未对其特征图谱进行深入研究。

发明内容

有鉴于此，本发明旨在构建一种高效液相特征图谱方法，全面反映盐吴茱萸及其相关制剂的质量水平，对盐吴茱萸饮片、盐吴茱萸提取物、盐吴茱萸配方颗粒及其相关制剂的质量评价、吴茱萸药材基原鉴别及资源开发利用提供依据。

本发明提供了一种构建盐吴茱萸高效液相特征图谱的方法，包括以下步骤：

分别精密吸取参照物溶液、供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，建立高效液相特征图谱；

所述测定的色谱柱为Agilent TC-C18，以乙腈为流动相A，以0.05wt％～0.15wt％的磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱，检测波长为250nm～260nm，理论板数按绿原酸峰计算不低于3000。

优选的，所述参照物溶液的制备方法具体为：

取吴茱萸对照药材0.1g～1g，置具塞锥形瓶中，加水10ml～100ml加热回流提取10min～60min，取出，放冷，摇匀，离心，取上清液挥干，残渣加1ml～10ml50wt％～90wt％乙醇水溶液超声处理10min～30min，取出，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，作为对照药材的参照物溶液；

取吴茱萸碱、吴茱萸次碱、去氢吴茱萸碱、金丝桃苷、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸对照品，精密称定，加50wt％～90wt％乙醇水溶液制成每1ml各含40μg～60μg的溶液，作为对照品参照物溶液。

优选的，所述供试品溶液的制备方法具体为：