[发明专利]一种刺激树突状细胞成熟的方法及培养基有效

专利信息
申请号: 202210338128.3 申请日: 2022-04-01
公开(公告)号: CN114480277B 公开(公告)日: 2022-07-22
发明(设计)人: 时红波;张兴娜;刘超楠;卢旺;时红林 申请(专利权)人: 首都医科大学附属北京佑安医院
主分类号: C12N5/0784 分类号: C12N5/0784
代理公司: 北京汲智翼成知识产权代理事务所(普通合伙) 11381 代理人: 陈曦;刘娟
地址: 100069 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 刺激 树突 细胞 成熟 方法 培养基
【权利要求书】:

1.一种刺激树突状细胞成熟的方法,其特征在于,在未成熟树突状细胞刺激成熟过程中加入催熟剂无水乙醇进行刺激成熟培养,所述方法步骤如下:

(1)将未成熟的树突状细胞铺于培养皿中,加入培养基培养,待其贴壁后,换液;

(2)将步骤(1)得到的细胞在含有催熟剂无水乙醇的培养基中刺激培养中至少24小时,收集细胞及上清。

2.如权利要求1所述的刺激树突状细胞成熟的方法,其特征在于,所述无水乙醇的添加浓度为400 mmol/L~800 mmol/L。

3.如权利要求1或2所述的刺激树突状细胞成熟的方法,其特征在于,所述培养基为1640完全培养基。

4.一种刺激树突状细胞成熟的方法,其特征在于包括如下步骤:

(1)获取树突状细胞前体单个核细胞PBMC,在第一培养基培养下获得未成熟树突状细胞;

(2)将步骤(1)得到的细胞在第二培养基中促成熟培养,培养时间至少24小时,得到树突状细胞;

所述第一培养基为内含GM-CSF和IL-4的培养基,所述第二培养基为在第一培养基中加入催熟剂无水乙醇。

5.如权利要求4所述的刺激树突状细胞成熟的方法,其特征在于,所述无水乙醇的添加浓度为400 mmol/L~800 mmol/L。

6.如权利要求4所述的刺激树突状细胞成熟的方法,其特征在于,所述第一培养基为无血清的AIM-V培养基。

7.如权利要求4所述的刺激树突状细胞成熟的方法,其特征在于,所述GM-CSF的终浓度为800~1000U/ml,IL-4的终浓度为800~1000U/ml。

8.一种刺激树突状细胞成熟的培养基,所述培养基含有无水乙醇,所述无水乙醇的添加浓度为400 mmol/L~800 mmol/L。

9.无水乙醇在制备刺激树突状细胞成熟的催熟剂中的应用,其特征在于,所述无水乙醇的工作浓度为400 mmol/L~800 mmol/L。

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