[发明专利]一种鉴别大口黑鲈遗传性别的分子标记及其引物对有效
| 申请号： | 202210338034.6 | 申请日： | 2022-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN114717301B | 公开（公告）日： | 2023-08-08 |
| 发明（设计）人： | 李完波;何奇伟;叶坤 | 申请（专利权）人： | 集美大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6879 | 分类号： | C12Q1/6879;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 厦门市精诚新创知识产权代理有限公司 35218 | 代理人： | 秦华 |
| 地址： | 361000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 大口 遗传性 别的 分子 标记 及其 引物 | ||
【权利要求书】：
1.一种鉴别大口黑鲈遗传性别的分子标记，其特征在于，其分子标记的序列如SEQ IDNO:1所示,所述分子标记存在于大口黑鲈遗传性别X染色体上，在Y染色体上缺失。
2.一种鉴别大口黑鲈遗传性别的分子标记的引物对，其特征在于，引物对的序列如SEQID NO:2和3所示。
3.一种采用权利要求2所述引物对检测权利要求1分子标记的方法，其特征在于，通过权利要求2的引物对对待测DNA进行PCR扩增。
4.一种鉴别大口黑鲈遗传性别的方法，其特征在于，采用权利要求2的引物对进行PCR检测，当采用SEQ ID NO:2和3引物对时，PCR扩增片段有两条大小不同的特异条带345bp和314bp，则判断待测大口黑鲈的遗传性别为雄性；PCR扩增片段只有一条特异条带345bp，则判断待测大口黑鲈的遗传性别为雌性。
5.如权利要求4所述方法，其特征在于，所述PCR检测的反应体系为，以反应总体积为10μl计算，5μl 2×Pro Taq Master Mix，1μl 30ng/μl模板DNA，0.4μl 10μM正反向引物，最后加ddH2O补齐。
6.如权利要求4所述方法，其特征在于，所述PCR检测的扩增条件为：95℃预变性3min，95℃变性30s，55℃退火15s，72℃延伸30s，30～35个循环后接着72℃延伸5min。
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