[发明专利]一种共培养巨噬细胞和肝癌细胞的体系和方法在审
| 申请号： | 202210337730.5 | 申请日： | 2022-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN114634907A | 公开（公告）日： | 2022-06-17 |
| 发明（设计）人： | 羊东晔;刘冬萌;郭嘉琪;周丽诗;符艳秋;李玉林 | 申请（专利权）人： | 香港大学深圳医院 |
| 主分类号： | C12N5/0786 | 分类号： | C12N5/0786;C12N5/071;C12N5/09 |
| 代理公司： | 北京汇众通达知识产权代理事务所(普通合伙) 11622 | 代理人： | 尹全杰 |
| 地址： | 518000 广东省深*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 培养 巨噬细胞 肝癌 细胞 体系 方法 | ||
1.一种共培养巨噬细胞和肝癌细胞的体系，其特征在于，包括胎牛血清、Ham'sF-12K基础培养基和DMEM高糖培养基。
2.根据权利要求1所述的体系，其特征在于，所述体系包括含20％胎牛血清的Ham's F-12K基础培养基和含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基。
3.根据权利要求2所述的体系，其特征在于，所述含20％胎牛血清的Ham's F-12K基础培养基和含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基的体积比为1:8～1:1，优选为1:1。
4.根据权利要求1所述的体系，其特征在于，所述巨噬细胞为NR8383细胞；所述肝癌细胞为RH35细胞。
5.一种如权利要求1-4任一项所述体系的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一，将上述20％胎牛血清的Ham's F-12K基础培养基和含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基按照不同的体积比进行混合配制共培养体系，接种巨噬细胞或肝癌细胞；
步骤二，培养24小时后采用MTT法、钙黄绿素染色、细胞凋亡流式检测测定细胞的活力、死亡率或凋亡率，比较各个体积比下共培养体系中的巨噬细胞或肝癌细胞的活力、死亡率或凋亡率，选择最佳的体积比。
6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，步骤一中接种的巨噬细胞或肝癌细胞处于对数生长期。
7.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述构建方法还包括设置对照组和空白组；相对于所述肝癌细胞，对照组为含10％胎牛血清的DMEM高糖培养基中接种的肝癌细胞组，空白组为不含细胞的DMEM高糖培养基组；针对所述巨噬细胞，对照组为20％胎牛血清的Ham's F-12K基础培养基中接种的巨噬细胞组，空白组为不含细胞的Ham's F-12K基础培养基组。
8.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，步骤二中采用的MTT浓度为0.5％。
9.一种共培养巨噬细胞和肝癌细胞的方法，其特征在于，包括将所述巨噬细胞和肝癌细胞同时接种于如权利要求1-4任一项所述体系中进行培养。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述巨噬细胞为NR8383细胞；
所述肝癌细胞为RH35细胞。
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