[发明专利]一种快速检测血型抗体滴度的试剂、制备方法、试纸条及应用

说明书

本发明涉及血型检测技术领域，特别是涉及一种快速检测血型抗体滴度的试剂、制备方法、试纸条及应用。本发明所述试剂为红细胞膜偶联的荧光微球；所述试剂包括以下质量份的制备原料：荧光微球0.2份、EDC3000份和红细胞膜4份。本发明通过适宜的荧光微球、EDC(1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐)和红细胞膜复配，制备得到的试剂荧光强度高，便于检测，可以代替标准红细胞作为血型抗体滴度的检测试剂，将其包被于试纸上，可常温保存，无需冷藏，且红细胞内容物由荧光微球取代，不会发生溶血现象，可以用于复杂环境的血型抗体检测。

技术领域

本发明涉及血型检测技术领域，特别是涉及一种快速检测血型抗体滴度的试剂、制备方法、试纸条及应用。

背景技术

对于大失血休克患者而言，快速有效的输血是其救治的关键，而通用O型全血其红细胞表面无A、B抗原，因此无需交叉配血，节约时间，但由于O型血浆中含有抗-A和抗-B抗体，抗体的滴度也是因人而异，因而当受血者接受了含有高滴度抗体的O型血液后就会出现严重的急性溶血性输血反应。然而，具有低滴度的抗-A和抗-B抗体的O型全血可以安全的跨血型输血。目前低滴度O型全血(LTOWB)可用于非特定类型的紧急输血，从而显著降低输血反应的风险。

目前临床O型血浆中抗体水平的筛查主要有两种方法：试管法和微柱凝胶法。试管法通过倍比稀释供体血浆，然后与试管中标准红细胞反应，传统的盐水试管法进行抗体滴度检测虽己得到广泛应用但却具有操作比较复杂、程序繁多、实验结果影响因素多等弊端。而作为高科技产物的微柱凝胶法是凝胶分子筛技术和免疫学抗原抗体反应相结合的产物，通过调节凝胶(葡聚糖)的浓度，控制凝胶间隙大小，只允许游离红细胞通过，从而达到分离游离红细胞和凝集红细胞的目的，虽然具有高度的敏感性，但对实验环境和标本要求高、且成本高昂，需要的仪器设备复杂。除此之外，流式细胞术、微板法等也用于血型抗体的检测。流式细胞术使用荧光标记的抗血型抗体实现抗-A(B)的定量检测。固相微板法，用戊二醛处理的微板使红细胞与微板板底牢固结合，在微板中加入倍比稀释的供体血浆，离心后读取抗-A(B)滴度，且成本低廉、操作简便，适用于大批量样本检测。但这些方法都需要冷藏保存的红细胞，且无法满足即时检测需求，以应对复杂的环境，因此亟需开发一种可常温储存且适用于复杂环境的血型抗体检测试剂。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种快速检测血型抗体滴度的试剂、制备方法、试纸条及应用。本发明提供的的试剂可以代替标准红细胞作为血型抗体滴度的检测试剂，将其包被于试纸上，可常温保存，无需冷藏，且红细胞内容物由荧光微球取代，不会发生溶血现象，可以用于复杂环境的血型抗体检测。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供了一种快速检测血型抗体滴度的试剂，所述试剂为红细胞膜偶联的荧光微球；所述试剂包括以下质量份的制备原料：荧光微球0.2份、EDC 3000份和红细胞膜4份。

优选的，所述红细胞膜包括只含A抗原或B抗原的红细胞膜。

本发明还提供了上述试剂的制备方法，包括以下步骤：

将荧光微球和EDC溶于水后混合，得到活化后的荧光微球溶液；

将活化后的荧光微球溶液和红细胞膜混合，得到沉淀为所述试剂。

优选的，得到试剂后还包括：将所述试剂与保存液混合；所述保存液包括以下组分：水1000mL、Na₂HPO₄12g、Tris 3.6g、BSA 10g、果糖20g、PVP-40 1g、HCl 1.34mL、NaN₃0.025g、酪蛋白8g、NaCl 0.85g和PEG-255g。

本发明还提供了一种快速检测血型抗体滴度的试纸条，所述试纸条的反应区包被有上述试剂。

优选的，所述试剂的包被浓度为0.5～1.8mg/mL。