[发明专利]蒙古扁桃及其近缘种正丁醇部位HPLC指纹图谱的构建方法

说明书

本发明涉及一种蒙古扁桃及其近缘种正丁醇部位HPLC指纹图谱的构建方法。所述HPLC的色谱条件包括色谱柱为C18色谱柱；流动相B为乙腈，流动相C为水；采用线性梯度洗脱，检测波长：210nm～225nm；流速为0.5～1.5mL/min；柱温：30～35℃；进样量5～15μL。本发明首次建立了精密度、稳定性和重现性良好的蒙古扁桃及其近缘种正丁醇部位提取物的HPLC指纹图谱，同时结合成分含量测定结果，能够对蒙古扁桃及其近缘种的质量进行更加全面地控制。

技术领域

本发明属于医药检测技术领域，具体而言，涉及一种蒙古扁桃及其近缘种正丁醇部位HPLC指纹图谱的构建方法。

背景技术

扁桃(Amygdalus communis L.)又名巴旦杏，为蔷薇科桃属扁桃亚属的落叶乔木或灌木，其原生产于中亚地区的山区，如今在中国新疆维吾尔自治区、内蒙古自治区、甘肃省、陕西省等地均有分布，是世界著名的木本油料树种之一，属于国家濒危保护植物。目前我国有扁桃野生种6种，包括普通扁桃(Amygdalus commacis L.)、蒙古扁桃(Amygdalusmongolica(Maxim.)Ricker)、长梗扁桃(Amygdalus pedunculata Pall.长柄扁桃)、榆叶梅(Amygdalus triloba(Lindl.)Ricker)、西康扁桃(Amygdalus tangutica(Batal.)Korsh.唐古特扁桃)和矮扁桃(Amygdalus nana L.康定樱桃)。其种仁可代“郁李仁”入药，具有止咳活血、治疗支气管炎、预防癌症、润肠通便以及利尿的功效，同时在抗氧化、降血脂等方面也效果显著。且含有丰富的脂肪油(约占50％以上)、维生素、苦杏仁苷、蛋白质和氨基酸等，营养价值极高，既可入药也可作为保健食品，是集社会、经济效益为一体的优良树种。

现有技术对蒙古扁桃和长梗扁桃的药理作用进行了大量研究：吴桐等研究表明蒙古扁桃药材正丁醇提取物具有改善大鼠肝纤维化、保护肝脏的作用；权博文等研究表明蒙古扁桃药材正丁醇部位提取物是发挥抗大鼠肺纤维化的有效活性部位；常虹和刘庆等研究表明蒙古扁桃药材正丁醇提取物可明显改善大鼠肾纤维化。赵云山和白迎春等研究表明蒙古扁桃和长梗扁桃药材种仁正丁醇部位提取物具有降血脂的作用，并首次从中提取出苦杏仁苷单体化合物。

中药成分复杂，利用一定的方法对其药品质量的一致性和稳定性进行全面的分析和评价是十分重要的。中药指纹图谱是一种综合、可量化的鉴定手段，包括高效液相色谱法(HPLC)、红外光谱法(IR)、核磁共振法(NMR)等鉴定方法，广泛应用于中药质量控制、真伪鉴别和谱效关系研究，并在以上领域发挥了独特的优势。因此中药指纹图谱的建立，对提高中药品质，促进中药现代化发展意义重大。权博文等首次建立了扁桃的HPLC指纹图谱，为评价扁桃药材的质量提供了一定的方法依据，但对其发挥药效的活性部位的指纹图谱鲜有研究。

发明内容

为扁桃药材的鉴定、药材质量控制提供更加全面的实验依据，本发明提供了一种蒙古扁桃及其近缘种正丁醇部位HPLC指纹图谱的构建方法。

本发明以内蒙古包头固阳忽鸡沟、内蒙古包头爬榆树、内蒙古包头九峰山、内蒙古阿拉善左旗巴彦诺日公、内蒙古包头赵长城、河北省张家口和内蒙古包头市7种产地的10批扁桃药材为研究对象，进一步对其种仁正丁醇部位进行了HPLC指纹图谱研究并对其相似度进行分析，同时利用该方法对扁桃种仁正丁醇提取物中的苦杏仁苷进行了含量测定，以更加科学、全面、深入地评价蒙古扁桃及其近缘种药材的质量与品质。

一种蒙古扁桃及其近缘种正丁醇部位HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)供试品溶液的制备

称取扁桃种仁研碎过筛的粗粉，加5-15倍量乙醇回流提取，提取液回收乙醇并浓缩为稠浸膏；将稠浸膏加水溶解，之后将溶液加石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇各萃取1-5次，将各萃取液浓缩至干得各部位提取物；称取正丁醇部位提取物，加甲醇溶解，超声处理，冷却，摇匀后取溶液适量，离心，取上清，用微孔滤膜滤过，即得扁桃药材正丁醇部位提取物供试品溶液；