[发明专利]ATP在LAMP中的新用途、LAMP扩增体系和试剂盒

权利要求书

1.ATP在LAMP中抑制非特异性扩增的应用，其中LAMP扩增体系中ATP浓度为1.6mmol/L。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，LAMP扩增体系中还含有4～15mmol/L的硫酸镁。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，LAMP扩增体系由ATP、核酸模板、引物、核酸聚合酶、缓冲液、dNTPs、硫酸镁组成。

4.根据权利要求1所述应用，其特征在于，核酸模板为DNA模板，选自λDNA或GP130质粒，其中GP130质粒购自PPL，货号为PPL00004S。

5.一种LAMP扩增体系，其特征在于：所述体系由ATP、核酸模板、引物、核酸聚合酶、缓冲液、dNTPs、硫酸镁组成；

所述核酸模板为λDNA，所述引物包括上游内引物、下游内引物、上游外引物、下游外引物、环引物；所述上游内引物的序列如SEQ NO.1所示，所述下游内引物的序列如SEQ NO.2所示；所述上游外引物的序列如SEQ NO.3所示，所述下游外引物的序列如SEQ NO.4所示；所述环引物的序列如SEQ NO.5所示；

所述ATP 1.6mmol/L，所述引物包括：上游内引物0.5～2.5μmol/L、下游内引物0.5～2.5μmol/L、上游外引物0.05～0.4μmol/L、下游外引物0.05～0.4μmol/L、环引物0.4～1.2μmol/L；所述核酸聚合酶4～10U/μL，所述硫酸镁3.9～11mmol/L，所述λDNA 4～4x10⁶copies/μl；所述缓冲液的pH为7.5～9.4，包括：Tris-HCl 10～40mmol/L，KCl 4～20mmol/L，(NH₄)₂SO₄4～20mmol/L，MgSO₄0.1～5mmol/L，Triton X-1000.01w/w％～1w/w％；所述dNTPs包括：dATP 0.1～3mmol/L，dGTP 0.1～3mmol/L，dCTP 0.1～3mmol/L，dTTP 0.1～3mmol/L。

6.根据权利要求5所述的扩增体系，其特征在于，所述ATP 1.6mmol/L，所述引物包括：上游内引物1.0～2.0μmol/L，下游内引物1.0～2.0μmol/L，上游外引物0.1～0.3μmol/L，下游外引物0.1～0.3μmol/L，环引物0.6～1.0μmol/L；所述核酸聚合酶5～9U/μL，所述硫酸镁5～10mmol/L，所述λDNA 4x10¹～4x10⁵copies/μl；所述缓冲液的pH为8.0～9.0，包括：Tris-HCl 15～30mmol/L，KCl 7～15mmol/L，(NH₄)₂SO₄7～15mmol/L，MgSO₄1～3mmol/L，TritonX-1000.05w/w％～0.5w/w％；所述dNTPs包括：dATP 0.5～2mmol/L，dGTP 0.5～2mmol/L，dCTP 0.5～2mmol/L，dTTP 0.5～2mmol/L。