[发明专利]一种食品中重要呈滋味物质同时测定的方法

权利要求书

1.一种食品中重要呈滋味物质同时测定的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)配置混合内标的工作液：

配制终浓度为50-400ng/mL的混合内标的工作液；

(2)样品前处理：

称取1-5g样品加入1-7mL的超纯水和1-8mL的冰甲醇，匀浆；再加入5-15mL的甲基叔丁基醚，漩涡震荡、离心，取下层液体，加入甲醇/异丙醇混合溶液，离心后取上清液，得到待挥干样品；将待挥干样品干燥后用与待挥干样品相同体积的混合内标的工作液重新溶解，离心后取上清液，得到待测呈滋味物质检测样品；

(3)进行测试：

采用Agilent InfinityLab Poroshell 120HILIC-Z(2.1mm×150mm,2.7μm)色谱柱，通过高效液相色谱与三重四极杆质谱联用仪测定；其中，高效液相色谱的测试的条件为：

进样量：5μL；

采集模式：MRM；

柱温：40℃；

正离子模式流动相：A相为乙腈/水(20:80,v/v)0.02％乙酸+10mM乙酸铵；B相为乙腈/水(90:10,v/v)0.02％乙酸+10mM乙酸铵；

负离子模式流动相：A相为乙腈/水(20:80,v/v)0.1％氨水+10mM碳酸铵；B相为乙腈/水(90:10,v/v)0.1％氨水+10mM碳酸铵；

洗脱流速：0.3mL/min；

洗脱梯度：0-1min：100％B；1-15min：100-30％B；15-17min：30％B；17-17.1min：30-100％B；17-25.4min：100％B；

(4)定量：

将测试结果得到的待测呈滋味物质检测样品中的待测组分峰面积和内标峰面积的比值带入标准曲线进行计算，得到待测呈滋味物质样品中呈滋味物质的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述配置混合内标的工作液采用D₃-丙氨酸(D₃-Alanine)、D₃-谷氨酸(D₃-Glutamic acid)、D₃-天冬氨酸(D₃-Asparticacid)、D₃-次黄嘌呤(D₃-Hypoxanthine)、D₉-氧化三甲胺(D₉-TMAO)、¹³C₂-琥珀酸(¹³C₂-succinic acid)、¹³C₃-胞苷单磷酸(¹³C₃-CMP)作为内标。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中质谱采用电喷雾电离源(ESI)；正离子模式和负离子模式进行检测；ESI源参数设置为：

气帘气(CUR)：35psi；

离子化温度(TEM)：600℃；

雾化气(GS1)：60psi；

辅助加热气(GS2)：60psi；

碰撞气(CAD)：Medium；

在正离子模式下，射入电压(EP)：10V，喷雾电压(IS)：5500V；

在负离子模式下，射入电压(EP)：-10V，喷雾电压(IS)：-4500V。