[发明专利]一种抗肿瘤树突状细胞及其制备方法、表达载体及应用有效
申请号: | 202210295417.X | 申请日: | 2022-03-23 |
公开(公告)号: | CN114621929B | 公开(公告)日: | 2023-05-30 |
发明(设计)人: | 李冬贝;魏旭东;李海军;范瑞华;米瑞华;陈琳;程诚 | 申请(专利权)人: | 河南省肿瘤医院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N5/0784;C12N15/867;C12N15/12;A61K39/00;A61P35/00 |
代理公司: | 北京睿智保诚专利代理事务所(普通合伙) 11732 | 代理人: | 周新楣 |
地址: | 450003 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肿瘤 树突 细胞 及其 制备 方法 表达 载体 应用 | ||
1.一种抗肿瘤树突状细胞,其特征在于,所述抗肿瘤树突状细胞为经synNotch受体改造的树突状细胞,synNotch受体包括PD-1胞外域,Notch跨膜域和转录调节模块Gal4-VP64,所述synNotch受体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,其编码基因的核苷酸序列如SEQ IDNO:2所示;所述抗肿瘤树突状细胞内引入转录调控模块GAL4-UAS-TRAF6,所述转录调控模块的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示;所述经synNotch受体改造的树突状细胞为DC2.4。
2.一种如权利要求1所述的抗肿瘤树突状细胞的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)分别合成synNotch受体编码基因以及转录调控模块编码基因;
(2)将synNotch受体编码基因克隆到慢病毒载体上,获得synNotch受体重组慢病毒载体;将转录调控模块编码基因克隆到慢病毒载体上,获得转录调控重组慢病毒载体;
(3)将synNotch受体重组慢病毒载体、转录调控重组慢病毒载体进行慢病毒包装,获得慢病毒;
(4)将所述慢病毒感染树突状细胞。
3.一种用于改造树突状细胞的表达载体,其特征在于,包括synNotch受体表达载体和转录调控表达载体,所述synNotch受体表达载体上携带有synNotch受体编码基因,所述synNotch受体编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示,所述转录调控表达载体上携带有转录调控元件编码基因,所述转录调控元件编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
4.如权利要求3所述的表达载体,其特征在于,synNotch受体表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
5.如权利要求3或4所述的表达载体,其特征在于,所述转录调控表达载体的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示。
6.一种如权利要求1所述的抗肿瘤树突状细胞或如权利要求3~5中任一项所述的表达载体在制备抗PD-L1阳性的肿瘤药物方面的应用。
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