[发明专利]一种基于CD7的人源化嵌合抗原受体及其应用

说明书

本发明涉及一种基于CD7的人源化嵌合抗原受体及其应用，具体为以肿瘤特异靶点CD7为基础的嵌合抗原受体T(CAR‑T)细胞技术的构建方法及其在抗肿瘤治疗中的应用，所述嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激信号传导区和CD3ζ信号传导结构域串联而成；其中，所述抗原结合结构域结合肿瘤表面抗原，所述肿瘤表面抗原为CD7。本发明的人源化嵌合抗原受体通过对CD7抗原具特异性的单链抗体，进行特定的基因改造，改造后的人源化单链抗体能够使抗原‑抗体结合力更强，嵌合受体对T细胞的刺激更优化，体内维持更长久，且相比于其它CD7嵌合抗原受体有更好的靶向效果，增强CAR‑T细胞的治疗效果。

本申请要求申请号为202110640020.5专利申请的优先权(在先申请的申请日为2021年6月8日，发明名称为一种基于CD7的嵌合抗原受体及其应用)。

技术领域

本发明涉及肿瘤的细胞免疫治疗领域，尤其涉及一种基于CD7的人源化嵌合抗原受体及其应用，具体为以肿瘤特异靶点CD7为基础的嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞技术的构建方法及其在抗肿瘤治疗中的应用。

背景技术

随着肿瘤免疫学理论和临床技术的发展，嵌合抗原受体T细胞疗法(Chimericantigen receptor T-cell immunotherapy，CAR-T)成为目前最有发展前景的肿瘤免疫疗法之一。一般，嵌合抗原受体CAR由一个肿瘤相关抗原结合区、胞外铰链区、跨膜区域以及胞内信号转导区组成。通常，CAR包含抗体的单链片段可变(Single chain fragmentvariable，scFv)区或对肿瘤相关抗原(tumor associated antigen,TAA)具有特异性的结合结构域，其通过铰链和跨膜区与T细胞信号传导分子的胞质结构域偶联。最常见的淋巴细胞活化部分包括与T细胞效应物功能触发(例如CD3ζ)部分串联的T细胞共刺激结构域。CAR介导的过继性免疫疗法允许CAR-移植的T细胞以非HLA限制性方式直接识别靶肿瘤细胞上的TAA。

大多数患有T细胞恶性肿瘤(包括T细胞急性淋巴细胞性白血病(T cell acutelymphocytic leukemia,leukemia,T-ALL)和T细胞淋巴瘤(T lymphocytic lymphoma)的患者将由于其疾病而死亡。治疗这些患者的一种方法是通过CAR的表达，对T细胞进行基因修饰靶向在肿瘤细胞上表达的抗原。CAR是经设计以人白细胞抗原(human leukocyteantigen,HLA)非依赖性方式识别细胞表面抗原的抗原受体。尝试使用表达CAR的基因修饰细胞来治疗这些类型的患者已经取得了有前景的成功。

CD19分子是治疗B淋巴细胞系肿瘤潜在的靶点，也是CAR研究中的热点。CD19的表达局限于正常和恶性B细胞，是广泛接受的用来安全测试的CAR靶标。靶向CD19分子的嵌合抗原受体基因修饰的T细胞(CD19 CAR-T)在治疗多发性、难治性的急性B淋巴细胞白血病上取得巨大成功。然而在针对难治性、复发性T淋巴细胞白血病和T淋巴细胞系淋巴瘤的治疗中，相关CAR-T治疗技术相对落后缺乏。

CN 104788573 A公开了了一种嵌合抗原受体hCD19scFv-CD8α-CD28-CD3ζ及其用途，该嵌合抗原受体由抗人CD19单克隆抗体HI19a轻链和重链可变区(hCD19scFv)、人CD8α铰链区、人CD28跨膜区和胞内区、以及人CD3ζ胞内区结构串联构成，该专利中的CD19在进行一次CAR-T细胞回输后，CD19的表达量会降低，容易逃过免疫机制。而对于T细胞肿瘤靶向的CAR-T技术应用相对缺乏。