[发明专利]一种基于CD7的人源化嵌合抗原受体及其应用

权利要求书

1.一种基于CD7的人源化嵌合抗原受体，其特征在于，所述人源化嵌合抗原受体包括抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激信号传导区和CD3ζ信号传导结构域串联而成；

其中，所述抗原结合结构域结合肿瘤表面抗原，所述肿瘤表面抗原为CD7。

2.根据权利要求1所述的基于CD7的人源化嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗原结合结构域包括人源化CD7单链抗体；

优选地，所述人源化CD7单链抗体的核苷酸序列包括同源性80％以上的SEQ ID NO.1所示的序列；

优选地，所述人源化CD7单链抗体的氨基酸序列包括同源性80％以上的SEQ ID NO.2所示的序列；

优选地，所述人源化嵌合抗原受体的核苷酸序列包括同源性80％以上的SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示的序列；

优选地，所述人源化嵌合抗原受体的氨基酸序列包括同源性80％以上的SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示的序列。

3.根据权利要求1或2所述的基于CD7的人源化嵌合抗原受体，其特征在于，所述跨膜结构域为CD28跨膜结构域和/或CD8α跨膜结构域；

优选地，所述共刺激信号传导区为CD28信号传导结构域结合4-1BB、CD27或IL-15R信号传导结构域的组合。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的基于CD7的人源化嵌合抗原受体，其特征在于，所述人源化嵌合抗原受体还包括自毁结构域；

优选地，所述自毁结构域包含胱天蛋白酶9结构域；

优选地，所述自毁结构域通过2A序列与所述CD3ζ信号传导结构域相串联。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的基于CD7的人源化嵌合抗原受体，其特征在于，所述人源化嵌合抗原受体包括信号肽、抗原结合结构域、跨膜结构域、共刺激信号传导区、CD3ζ信号传导结构域、2A序列和自毁结构域串联而成；

优选地，所述人源化嵌合抗原受体为Secretory信号肽、人源化CD7单链抗体、CD8α和/或CD28跨膜结构域、CD28信号传导结构域与CD27、4-1BB或IL-15R信号传导结构域的组合、CD3ζ信号传导结构域、2A序列和胱天蛋白酶9结构域串联而成。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的基于CD7的人源化嵌合抗原受体，其特征在于，所述人源化嵌合抗原受体为Secretory信号肽-人源化CD7单链抗体-CD28-4-1BB-CD3ζ；

优选地，所述Secretory信号肽-人源化CD7单链抗体-CD28-4-1BB-CD3ζ的ORF核酸序列如SEQ ID NO.3所示；

优选地，所述人源化嵌合抗原受体为Secretory信号肽-人源化CD7单链抗体-CD28-CD27-CD3ζ-2A-iCasp9；

优选地，所述Secretory信号肽-人源化CD7单链抗体-CD28-CD27-CD3ζ-2A-iCasp9的ORF核酸序列如SEQ ID NO.4所示；

优选地，所述嵌合抗原受体为Secretory信号肽-人源化CD7单链抗体-CD28-IL-15R-CD3ζ；

优选地，所述Secretory信号肽-人源化CD7单链抗体-CD28-IL-15R-CD3ζ的ORF核酸序列如SEQ ID NO.5所示。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的基于CD7的人源化嵌合抗原受体，其特征在于，所述人源化嵌合抗原受体的制备方法包括将编码其的核酸序列转染到T细胞中表达；

优选地，所述转染的方式为通过病毒载体、真核表达质粒或mRNA序列中的任意一种或至少两种的组合转染到T细胞，优选为通过病毒载体转染到T细胞；

优选地，所述病毒载体为慢病毒载体或逆转录病毒载体中的任意一种或至少两种的组合，优选为慢病毒载体。

8.一种重组慢病毒，其特征在于，所述重组慢病毒包含表达权利要求1-7任一项所述的基于CD7的人源化嵌合抗原受体的载体。