[发明专利]一种用于临床样本检测的快速提取核酸方法

说明书

本发明涉及临床样本检测技术领域，尤其为一种用于临床样本检测的快速提取核酸方法，包括以下步骤：S1，取0.5ml‑1ml临床生物样本，将临床生物样本加入装有混合磁珠的试管中，混合均匀后静置12min‑15min，将试管置于磁力架上并静置3min‑5min后，送入离心机中进行离心处理，在12000rmp的条件下离心3.5min，吸弃上清液；S2，向试管中加入1.5ml生理盐水，在旋涡振荡器内振荡打散沉淀，送入离心机中进行离心处理，在12000rmp的条件下离心6min‑9min，吸弃上清液，使用移液枪向试管中加入85ul‑90ul第一处理液，等待试管内溶液变得清亮后再加入15ul‑20ul的醋酸钾缓冲液，本发明可以有效解决目前现行的提取核酸的方法需要进行反复的离心，提取步骤繁杂、耗费时间长、需要特定的设备，无法快速提取的问题。

技术领域

本发明涉及临床样本检测技术领域，具体为一种用于临床样本检测的快速提取核酸方法。

背景技术

核酸是遗传信息的携带者，是基因表达的物质基础，无论是进行核酸结构还是功能研究，首先需要从复杂多样的生物样本中迅速有效地分离和提取所需要的基因组核酸，而且抽提后的核酸质量及其完整性都会直接影响到随后的实验结果。

对于利用核酸扩增技术进行分子诊断的主要挑战是扩增前含核酸材料的预处理以及繁杂的核酸提取步骤，目前广泛使用的基于二氧化硅和基于磁珠的技术存在着诸多缺陷，包括效率过低(≤10％)；还有需要针对特定靶标类型进行优化，造成一种样品类型的提取过程通常与其他样品类型不相容；而利用酚氯仿的方法虽然回收率高，但是由于提取液组分的毒性高而限制了其适用范围；基于去污剂的方法溶解过程简单，但需要进行高温变性(95℃)处理，另外由于反转录酶不是热稳定的，因此不适用于单步骤RT-PCR。

目前现行的提取核酸的方法需要进行反复的离心，提取步骤繁杂、耗费时间长、需要特定的设备，无法快速提取。

综上所述，本发明提供一种用于临床样本检测的快速提取核酸方法来解决这一问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于临床样本检测的快速提取核酸方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种用于临床样本检测的快速提取核酸方法，包括以下步骤：

S1，取0.5ml-1ml临床生物样本，将临床生物样本加入装有混合磁珠的试管中，混合均匀后静置12min-15min，将试管置于磁力架上并静置3min-5min后，送入离心机中进行离心处理，在12000rmp的条件下离心3.5min，吸弃上清液；

S2，向试管中加入1.5ml生理盐水，在旋涡振荡器内振荡打散沉淀，送入离心机中进行离心处理，在12000rmp的条件下离心6min-9min，吸弃上清液，使用移液枪向试管中加入85ul-90ul第一处理液，等待试管内溶液变得清亮后再加入15ul-20ul的醋酸钾缓冲液，混合均匀，等待试管内出现白色絮状沉淀后，再次送入离心机中进行离心处理，在12000rmp的条件下离心6.5min-8.5min，吸弃上清液，并向试管中加入洗涤液，混合均匀后，置于磁力架上放置5.5min-6min，收集洗脱液，即得临床生物样本核酸溶液；

S3，将临床生物样本核酸溶液送入装有提取液的收集管中，混合均匀后，将吸附膜浸渍于提取溶液，静置15min-20min，将吸附膜取出，使用洗脱液缓慢清洗吸附膜，再将吸附膜置于PCR反应液，调节PCR反应液的pH为8.4，吸附膜向PCR反应液中释放核酸。