[发明专利]一种具有抗氧化活性的色烯类化合物及其制备方法与应用有效

专利信息
申请号: 202210244510.8 申请日: 2022-03-14
公开(公告)号: CN114920723B 公开(公告)日: 2023-07-14
发明(设计)人: 肖冬;张伟;朱玲超;阴耕云;师建全;樊瑛;王晋;张贵平;王凯;王明锋 申请(专利权)人: 云南中烟工业有限责任公司
主分类号: C07D311/76 分类号: C07D311/76;C12P17/06;C12N1/14;A24B15/40;C12R1/66
代理公司: 北京市领专知识产权代理有限公司 11590 代理人: 李静;任永利
地址: 650231 云*** 国省代码: 云南;53
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摘要:
搜索关键词: 一种 具有 氧化 活性 色烯类 化合物 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种具有抗氧化活性的色烯类化合物,其特征在于,其具有下述结构:

2.根据权利要求1所述的色烯类化合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)浸膏提取:对从雪茄烟烟叶中分离出的花斑曲霉YATS1111进行固体发酵,其发酵产物用90wt%-99wt%的乙醇超声提取并过滤再浓缩,然后加入乙酸乙酯与水混合液,充分搅拌混合均匀,静置分层后分出乙酸乙酯相;乙酸乙酯相减压浓缩成浸膏;所述花斑曲霉菌株YATS1111保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号是CGMCCNo.19910;

乙酸乙酯与水混合液中,乙酸乙酯与水体积比为1:1-1:2;

(2)硅胶柱层析:将步骤(1)得到的浸膏用200-300目硅胶干法装柱;所述硅胶与所述浸膏的质量比为2-5;以体积配比分别为10:0、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5的氯仿-甲醇溶液进行梯度洗脱,合并相同极性的部分,收集各部分洗脱液并浓缩;收集用体积比为8:2的氯仿-甲醇溶液洗脱时得到的洗脱液,称为第一洗脱液;将上述第一洗脱液浓缩后再次用硅胶层析柱继续分离,用体积配比依次为9:1、8:2、7:3、6:4、5:5的氯仿-丙酮溶液进行梯度洗脱,收集其中用体积比为6:4的氯仿-丙酮溶液洗脱时得到的洗脱液,称为第二洗脱液;

(3)高效液相色谱分离:将步骤(2)得到的第二洗脱液浓缩,第二洗脱液蒸干后更换溶剂为甲醇,通入高效液相色谱进行分离纯化,所述高效液相色谱法分离纯化是采用21.2mm×250mm,5μm的ZorbaxPrepHT GF色谱柱,流速为20mL/min,流动相为38wt%的甲醇水溶液,紫外检测器检测波长为334nm;每次进样200μL,收集每次进样后色谱峰保留时间为34.5min时所对应的洗脱液,称为第三洗脱液,将该第三洗脱液脱除溶剂后即得所述的色烯类化合物粗品;

(4)将步骤(3)的色烯类化合物粗品再次用纯甲醇溶解,以甲醇为流动相进行葡聚糖凝胶柱层析分离,即可得到所述的色烯类化合物纯品。

3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)花斑曲霉YATS1111进行固体发酵的步骤为:将分离得到的花斑曲霉菌种在室温下接种在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上,25~30℃培养7~10天,再接种在50~500mL的三角瓶中,置于25~30℃下震荡培养5~10天得到液体发酵种;每个三角瓶含10~100mL马铃薯葡萄糖培养基;

将液体发酵种进行规模化发酵,规模化发酵是在100~1000个0.5~2.0L的冯巴赫瓶中进行,每个瓶含有400~600g固体基质和60~400mL营养液;营养液的组成为:葡萄糖2.5wt%、蛋白胨0.10wt%、硝酸钾0.6wt%、磷酸二氢铵0.2wt%、七水合硫酸镁0.2wt%、复合氨基酸1wt%,其余量为水;

所述固体基质中,麦麸、小麦和玉米比例为1:3:5。

4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中乙醇的浓度为95wt%。

5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述浸膏在经硅胶柱层析粗分前,用甲醇溶解后用重量比1.5~2.5倍的80~120目硅胶拌样。

6.根据权利要求1所述色烯类化合物清除卷烟烟气自由基的用途。

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