[发明专利]LPS诱导的慢性肺损伤瘀热内结证小鼠模型的构建方法和模型的应用在审
申请号: | 202210240900.8 | 申请日: | 2022-03-10 |
公开(公告)号: | CN114514912A | 公开(公告)日: | 2022-05-20 |
发明(设计)人: | 崔霞;郭简宁;白雪;张宏贤;王瀚东;梁俊铭;郭子宜;张宁;陈倩;李炜 | 申请(专利权)人: | 北京中医药大学第三附属医院 |
主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02;A61K49/00 |
代理公司: | 北京中巡通大知识产权代理有限公司 11703 | 代理人: | 王霞 |
地址: | 100000 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | lps 诱导 慢性 损伤 瘀热内结证 小鼠 模型 构建 方法 应用 | ||
1.一种LPS诱导的慢性肺损伤瘀热内结证小鼠模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)配制成浓度为0.1mg/mL的LPS溶液,备用;
2)麻醉小鼠,通过小鼠口咽部气管插管,滴注步骤1)制得的LPS溶液,随后注入空气,然后将小鼠保持直立姿势;
3)间隔一天重复步骤2)操作,每周处理3次,持续处理6周;
4)在最后一次处理24h后,采集样本,制备抗凝全血及血清;
5)对抗凝全血进行血液流变学分析,对血清中的细胞因子进行分析,判断模型是否构建成功:
当血液流变学指标均显著增高,即表明其血液粘滞性增高,符合中医证候“瘀”的特质表现;
当血清中NO、MDA及IL-6的含量均上升,SOD含量下降,表明小鼠模型出现过氧化状态,符合中医证候“热”的特质表现;
达到上述“瘀”和“热”的特质表现,即表明成功构建LPS诱导的慢性肺损伤瘀热内结证小鼠模型。
2.根据权利要求1所述的LPS诱导的慢性肺损伤瘀热内结证小鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤2)中,采用软管滴注LPS溶液,滴注量为每g小鼠体重滴注2μL的LPS溶液。
3.根据权利要求1所述的LPS诱导的慢性肺损伤瘀热内结证小鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤2)中,注入空气的量为100μL。
4.根据权利要求1所述的LPS诱导的慢性肺损伤瘀热内结证小鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤2)中,注入空气后将小鼠保持直立姿势至少10min。
5.根据权利要求1所述的LPS诱导的慢性肺损伤瘀热内结证小鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤4)中,采集样本,制备抗凝全血及血清具体操作为:
麻醉小鼠,眼球取血1mL,将血液置于肝素钠抗凝管中,充分混匀,以制备抗凝全血及血清。
6.根据权利要求1所述的LPS诱导的慢性肺损伤瘀热内结证小鼠模型的构建方法,其特征在于,血液流变学指标包括全血粘度、血浆粘度即红细胞电泳指数。
7.根据权利要求1所述的LPS诱导的慢性肺损伤瘀热内结证小鼠模型的构建方法,其特征在于,所述小鼠为4周龄BALB/c雄性小鼠。
8.采用权利要求1~7中任意一项所述的构建方法构建得到的LPS诱导的慢性肺损伤瘀热内结证小鼠模型筛选慢性肺损伤瘀热内结证药物的应用。
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