[发明专利]检测转基因番木瓜的引物对组合、试剂盒及检测方法在审

专利信息
申请号: 202210221988.9 申请日: 2022-03-07
公开(公告)号: CN114622028A 公开(公告)日: 2022-06-14
发明(设计)人: 彭海;张静;谭生龙;肖华锋;李甜甜;李论;方治伟;高利芬;周俊飞;陈利红;万人静 申请(专利权)人: 江汉大学
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12Q1/6869;C12N15/11
代理公司: 北京众达德权知识产权代理有限公司 11570 代理人: 刘杰
地址: 430056 湖北省武*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 检测 转基因 番木瓜 引物 组合 试剂盒 方法
【权利要求书】:

1.一种检测转基因番木瓜的引物对组合,其特征在于,所述引物对组合包括

特异性扩增p35S的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.2所示;

特异性扩增t35S的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3至SEQ ID NO.4所示;

特异性扩增pNOS的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.5至SEQ ID NO.6所示;

特异性扩增tNOS的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.7至SEQ ID NO.8所示;

特异性扩增NPtII的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.9至SEQ ID NO.10所示;

特异性扩增PRSV_CP的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.11至SEQ ID NO.12所示;

特异性扩增replicase的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.13至SEQ ID NO.14所示;

和/或,特异性扩增GUS的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.15至SEQ ID NO.16所示。

2.根据权利要求1所述的引物对组合,其特征在于,所述引物对组合包括:

特异性扩增Rainbow-left的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.17至SEQ ID NO.18所示;

特异性扩增Rainbow-right的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.19至SEQ ID NO.20所示;

和/或,特异性扩增华农1号的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.21至SEQ ID NO.22所示。

3.根据权利要求1所述的引物对组合,其特征在于,所述引物对组合还包括用于扩增番木瓜内参基因CaP_papain的引物对。

4.根据权利要求1所述的引物对组合,其特征在于,扩增番木瓜内参基因CaP_papain的引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.23至SEQ ID NO.24所示。

5.根据权利要求1所述的引物对组合,其特征在于,所述引物对组合还包括:特异性扩增选自下组的番木瓜转基因元件的引物对:p35S、t35S、pNOS、tNOS、NPtII、PRSV_CP、replicase和GUS;所述引物对组合还包括特异性扩增选自下组的番木瓜转基因品系特异性序列的引物对:Rainbow-left、Rainbow-right和华农1号。

6.一种检测转基因番木瓜的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1-5任意一项所述的检测转基因番木瓜的所述引物对组合。

7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括第一容器,所述第一容器内含有所述引物对组合。

8.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括多重PCR预混液。

9.权利要求1-5任意一项所述的引物对组合、权利要求6-8任意一项的述的检测试剂盒在检测番木瓜及其相关产品中的应用。

10.一种检测转基因番木瓜的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

得到待测番木瓜的DNA和权利要求1-5任意一项所述的引物对组合;

以所述DNA为模板,将所述引物对组合加入反应体系中,进行扩增反应,得到扩增产物;

将所述扩增产物进行高通量测序,得到高通量文库;

将所述高通量文库中的基因序列进行分析,得到检测转基因番木瓜的结果。

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