[发明专利]羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用

说明书

本发明公开了羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用，该应用在无菌条件下从健康足月顺产胎儿的胎盘胎儿面钝性分离羊膜，用含有双抗溶液的无菌生理盐水清洗数次直至液体清亮，并用缓冲液对羊膜进行冲洗，然后将羊膜剪碎，将剪碎后的羊膜等间距的接种在一次性塑料无菌培养瓶中，并于培养瓶中加入适量的培养液。该羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用，通过从人体内提取、培养并制备的羊膜间充质干细胞混合物可以对血液中血糖、FC‑P与血糖比值和糖化血红蛋白起到明显的降低效果，羊膜间充质干细胞混合物可以促进胰岛素对糖类代谢的调节，避免糖类的堆积，从而进一步有效控制患者的糖尿病水平。

技术领域

本发明涉及羊膜干细胞技术领域，具体为羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用。

背景技术

人羊膜来源干细胞包括人羊膜上皮细胞、人羊膜间充质干细胞，研究表明人羊膜上皮细胞具有神经生物学功能，与神经干细胞具有同源性，神经干细胞研究虽起步较晚，但却是当前研究的热点，由于成体神经组织内NSC数量少，分散分布，取材困难，无免疫原性NSC细胞系建立困难以及异体移植存在的免疫排斥问题等原因，使NSC在神经系统疾病治疗中的应用受到一定的限制，随着对羊膜上皮细胞具有神经干细胞特性的研究逐步深入，羊膜干细胞为治疗神经系统退行性疾病和外伤性神经损伤将会带来新的契机。

但是，现有的羊膜间充质干细胞混合物大多运用于修复脊髓损伤，羊膜间充质干细胞混合物可以通过神经营养作用促进轴突生长，并抑制胶质瘢痕形成，达到修复脊髓损伤的效果。由于生活水平的不断提升，人群摄入的含糖食品越来越多，更多的人都患有不同程度的糖尿病，现有的糖尿病药物在治疗糖尿病的情况下效果较差，治疗时间长，无法短时间高效的控制患者体内的糖尿病水平，羊膜间充质干细胞混合物有治疗糖尿病的潜质。

发明内容

本发明的目的在于提供羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用，以解决上述背景技术中提出现有的糖尿病药物在治疗糖尿病的情况下效果较差，治疗时间长，无法短时间高效的控制患者体内的糖尿病水平的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：羊膜间充质干细胞混合物在制备治疗糖尿病药物中应用，该应用在无菌条件下从健康足月顺产胎儿的胎盘胎儿面钝性分离羊膜，用含有双抗溶液的无菌生理盐水清洗数次直至液体清亮，并用缓冲液对羊膜进行冲洗，然后将羊膜剪碎，将剪碎后的羊膜等间距的接种在一次性塑料无菌培养瓶中，并于培养瓶中加入适量的培养液。

优选的，所述培养瓶放置于恒温37度、并使得饱和湿度、体积分数为5％的二氧化碳培养箱中，所述培养瓶在培养箱中培养后，更换培养液，弃去未贴壁的细胞，根据羊膜周围细胞生长情况，决定换液时间。

优选的，所述培养瓶中的培养液弃去，并用无菌PBS清洗两次，除去残留的培养液，然后加入0.25％胰岛蛋白酶溶液，37度处理2分钟左右，将培养瓶中的细胞放入离心管中并离心3分钟，丢弃上清液，沉淀用培养液重悬，并将其继续培养在培养液中，补足培养液，次日换液，以后隔日换液一次，得到人羊膜间充质干细胞。

优选的，所述培养瓶在培养箱中培养时间为48-72h。

优选的，所述培养瓶中加入诱导剂、培养基、甘油磷酸钠和地塞米松。

优选的，所述人羊膜间充质干细胞对患者进行ADMSCs移植联合常规治疗。

优选的，所述患者在6、12、24个月的空腹C肽、空腹血糖、餐后2h血糖、FC-P与血糖比值、糖化血红蛋白含量进行检测，并观察患者无不良反应情况。

优选的，所述患者体内的餐后2h血糖、FC-P与血糖比值、糖化血红蛋白含量均比患者治疗前明显降低。